基因工程、动植物克隆和胚胎工程复习.ppt

现代生物科技专题专题复习 （1）基因工程的诞生 限制性核酸内切酶（限制酶） 载体 §2:植物组织培养的过程 §2:植物组织培养的过程 §3:胚胎工程 §3:胚胎工程 §3:胚胎工程 §3:胚胎工程 §3:胚胎工程 §3:胚胎工程 动物核移植实验 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核（供体核）,移入一个已经去掉细胞核的卵细胞中，形成重建的“合子”。 2.多莉的成功证明了什么？ 3.根据细胞生物学机理说明克隆羊获得成功的原因？ 1多莉羊的培育用到了哪些细胞工程技术? 核移植 动物细胞培养 胚胎移植等 电脉冲融合技术 受精卵 卵裂期 桑椹胚 囊胚（内含囊胚腔） 原肠胚（内含原肠腔） 胎儿形成 ：由具有全能性细胞构成，细胞数在32个左右，排列紧密，形似桑椹 内细胞团：发育成胎儿各组织 滋养层细胞：发育成胎膜和胎盘 ：最初发育在输卵管进行有丝分裂 外胚层 中胚层 内胚层 原肠腔 ：进行有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎总体积并不增加，或略有减少。 胚胎发育的过程 胚胎工程 胚胎工程是将雌性动物的早期胚胎,或者通过其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之发育为新个体的技术。 胚胎工程中需要用到的技术手段有体外受精、胚胎体外培养(动物细胞培养)、胚胎移植等。 1．胚胎工程和相应的技术手段 刚排出的卵子尚未完全成熟，仅完成第一次减数分裂，需要在输卵管内进一步成熟，直到减数第二次分裂的中期才能与精子结合完成减数分裂。所以在胚胎工程的体外受精中有卵细胞的采集和培养环节。 2．刚排出的卵是成熟的卵子吗？ 体内受精过程中精子是在雌性动物的生殖道发生相应的生理变化后，才获得受精能力。 胚胎工程的体外受精中精子获能的方法有培养法和化学诱导法，牛、羊的精子常用化学药物诱导获能，诱导获能的药物常用肝素和钙离子载体。 3．精子获能问题 (2009年浙江省会考试题)．下列有关动物胚胎移植的叙述，错误的是 A．受精卵或胚胎均能移植 B．超数排卵技术要使用相关的激素 C ．受体母畜必须处于与供体母畜同期发情的状态 D．试管动物培养只是受精及早期卵裂过程在试管中进行 5．受精卵可直接动物胚胎移植吗？ 供体母本要选择 的个体； 受体母本要选择 的个体； 受体母本与供体母本需要同一物种是为了使移植的胚胎在受体子宫中 。 处理供体母本是为了 ，采集卵细胞,获得较多的胚胎； 对供体和受体母畜进行注射 的同期发情处理，是为了使受体和供体的 ，这样才能使供体的胚胎移入受体后有相同或相似的生存条件，能够 。 6．供体母本、受体母本的选择和处理问题 具有优良遗传性状 健康和正常繁殖能力 不发生免疫排斥 超数排卵 促性腺激素 生理状态相同 正常发育 * 基因工程诞生的理论基础？ DNA是遗传物质的发现 DNA双螺旋结构的确立 中心法则 下列四种粘性末端需要几种限制酶？ 粘性末端旁标出的碱基对一般默认属于限制酶的识别序列 种类：质粒、噬菌体和动植物病毒 能够在受体细胞中复制并稳定地保存 对受体细胞无害 具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 具有某些标记基因，便于进行筛选。 作为载体的必要条件 宿主细胞 但天然质粒往往不能满足上述要求，因此需要根据不同目的和需要，对质粒进行人工改造，现在所使用的质粒几乎都是经过改造的。 （2）基因工程的原理及技术 基本原理 目的基因在宿主细胞中稳定存在和高效地表达。即复制、转录和翻译 变异类型：基因重组 目的： 实现性状定向改造 操作步骤 ①获得目的基因 ②形成重组DNA分子 ③将重组DNA分子导入受体细胞 ④筛选含有目的基因的受体细胞 ⑤目的基因表达 基因工程的的原理及技术 ①获得目的基因 （2）基因工程的的原理及技术 方法1：从基因文库中筛选目的基因 （需应用限制酶） 方法2：人工合成目的基因 逆转录法 化学合成法 a多数目的基因的获得方法 b真核细胞基因到原核细胞中表达 扩增目的基因 PCR技术 1.分离质粒、提取人体细胞DNA 2.分别用相同的限制性核酸内切酶处理质粒和人体DNA 3.将处理后的质粒与人体DNA片段混合；加入DNA连接酶，产物有重组质粒和非重组质粒 4.将上述质粒导入细菌细胞 5.用含有氨苄青霉素和X-gal的培养基培养细菌。 lacZ基因编码的蛋白质能催化X-gal的水解，并产生蓝色物质 基因文库的建立 6.将单个细胞扩大培养后放入细胞培养板 ①获得目的基因 ②形成重组DNA分子 （2）基因工程的的原理及技术 具有相同的物质和结构基础 [以