微生物学检验课件--7第八章___肠杆菌科.pptVIP

第七章 肠杆菌科 第一节 概述 24个菌属与医学有关, G+Cmol％39-59 正常菌群 变形杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、泛菌属、枸橼酸菌属、普罗威登菌属、摩根菌属 致病菌 致病性大肠埃希菌、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌属 二、临床意义 占临床分离菌总数的50％和Ｇ-总数的80％ 1.肠道外感染-条件致病菌 多为医院感染：泌尿道、呼吸道、伤口感染 以及败血症 2.肠道感染-致病菌 各种急、慢性肠道感染、食物中毒、旅行者腹 泻及肠热症等。 三、生物学特性 肠杆菌科共同生物学特性 （一）形态染色 1.中等大小G-杆菌 2.无芽胞；多数为周毛菌，能运动 3.均有菌毛；少数有荚膜或包膜 4.多数菌有F、Col、R质粒 （二）培养和生化特性 1.营养要求与培养 （1）需氧或兼性厌氧，营养要求不高 （2）普通琼脂生长良好，形成中等大小菌落 （3）液体培养基 均匀混浊生长 （4）常用选择培养基 中国蓝、EMB、MAC 、SS、HE琼脂 常用选择培养基 中国蓝平板 乳糖、中国蓝、玫瑰红酸 中国蓝：酸性-蓝色 玫瑰红酸：抑制G+球菌生长，酸性-黄色 伊红-美蓝（EMB）琼脂 乳糖、伊红、美蓝 酸性：紫黑色或紫红色化合物，有金属光泽 麦康凯（MAC）琼脂 乳糖、胆盐、中性红 SS琼脂 乳糖、胆盐、煌绿、硫代硫酸钠、枸橼酸铁、中性红 产硫化氢株：黑色菌落 HE琼脂 乳糖、蔗糖、水杨苷、硫代硫酸钠、枸橼酸铁铵、胆盐、酸性复红、溴麝香草酚蓝、酵母 克氏双糖铁（KIA）—高层斜面 乳糖、葡萄糖、硫代硫酸钠、硫酸亚铁、酚红 细菌在KIA中的生长现象 利用葡萄糖 底层变黄 利用乳糖 斜面和底层同时变黄 产生硫化氢 变黑 产生气体 培养基断裂或有气泡 变红用A表示 ，变黄用K表示 2.生化反应 活跃 （1）分解多种糖类、蛋白质，形成不同产物 （2）致病菌不发酵乳糖 （3）氧化酶阴性，触酶阳性 （4）硝酸盐还原试验阳性 （5）发酵葡萄糖：产酸或产酸产气 常规生化反应： KIA 、MIU、IMViC、硝酸 盐还原试验 MIU：动力-靛基质-尿素培养基 （半固体培养基） 成分：葡萄糖、尿素、酚红、蛋白胨 现象： 培养基变红-分解尿素 云雾状生长-有动力 加靛基质试剂变红-分解色氨酸 1.O抗原（菌体抗原） 细胞壁脂多糖层，有种属特异性，耐热 2.H抗原（鞭毛抗原） 不耐热，60℃30min破坏 O抗原和H抗原是肠杆菌科血清学分群和分 型的依据 3.表面抗原 O抗原外的不耐热多糖 大肠和志贺菌：K抗原 伤寒：Vi抗原 （四）变异性 1.S →R变异 2.H →O变异 3.其他变异 常见耐药性变异 （五） 抵抗力 抵抗力不强，加热60℃30min即被杀死，不耐 干燥，对一般化学消毒剂均敏感。 对低温有耐受力 能耐胆盐，能抵抗染料的抑菌作用 四、微生物检验 （一）检验程序 （二）标本采集 1.肠外标本:血液、脑脊液、痰液、脓汁、尿液等 2.肠道标本:新鲜粪便、肛拭子 （三） 直接镜检 肠道内标本无鉴别意义 （四）分离培养鉴定 1.肠外标本 血液、骨髓：先用肉汤增菌再接种血平板 其他含有杂菌标本：接种弱选择性培养基 2.肠道标本：常用选择鉴别培养基 （五）肠杆菌科细菌鉴定 1.常规生化鉴定:为实验室最常用的方法。 2.鉴定试剂盒:选用标准化和商品化的微生物鉴定试剂盒。 3.血清学鉴定 4.分子生物学鉴定 5.鉴定步骤 （1）科鉴别 与弧菌科、非发酵菌鉴别： 形态、葡萄糖发酵试验、氧化酶试验、鞭毛数量 （2）科内鉴别 商品化鉴定试剂盒：数字编码鉴定法 苯丙氨酸脱氨酶和VP试验初步分群 第二节　埃希菌属 Escherichia 埃希菌属包括5个种： 大肠埃希菌 蟑螂埃希菌偶 弗格森埃希菌 赫尔曼埃希菌 伤口埃希菌 一、临床意义 （一）致病因素 1.侵袭力：菌毛、定居因子抗原、K抗原 2.内毒素 与感染特征和严重程度有关 3.肠毒素 耐热肠毒素（ST） 不耐热肠毒素(LT) （二）所致疾病 肠道外感染 以化脓性感染和泌尿道感染最为常见 肠道内感染-胃肠炎 某些血清型可引起人类胃肠炎，与食入污染的食品和饮水有关，为外源性感染。 引起腹泻的大肠埃希菌 肠产毒素型大肠埃希菌（ETEC） 致病物质 菌毛 肠毒素：LT、ST 所致疾病 5岁以下婴幼儿腹泻 旅游者腹泻 肠致病型大肠埃希菌（EPEC ） 致病物质 不产生肠毒素及其他外毒素 无侵袭力 所致疾病 婴幼儿腹泻 （3）肠