基因工程--公开课.pptVIP

第三步：将目的基因导入受体细胞 主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的方法 （1）受体细胞常选用微生物 （2）培育转基因动物时，受体细胞一般选用受 精卵； （3）培育转基因植物时，受体细胞可选用受精卵或其他高度分化的体细胞。 第四步：目的基因的检测与鉴定 （1）检测：根据受体细胞是否具有某些标记性基因，判断目的基因是否导入； （2）鉴定：受体细胞是否表现出特定的性状，如棉花抗虫性状。 基因工程让细菌“吐蚕丝” ： 普通细菌 家蚕 提取 蚕丝蛋白基因 与运载体DNA结合 导入 转基因细菌(含蚕丝蛋白基因) 蚕丝蛋白 本节主要内容 1）基因工程的概念 2）基因操作的工具 3）基因工程的基本步骤 1、在基因工程中，切割运载体和含有目 的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 练习 A 2、不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、将目的基因带入受体细胞 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 3、（多选）有关基因工程的叙述中，错误的是 （ ） A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传 性状，培育生物新品种 B、重组DNA的形成在细胞内完成 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、质粒都可作为运载体 BD 4、下列四条DNA片段，彼此间能被连接酶缝合的一组是 A．①② B．②③ C．③④ D．②④ （ ） D 5、以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来 C 家蚕能够吐出蚕丝为人类利用 能否让细菌“吐出”蚕丝？ 设想 （一）基因工程的概念 基因工程，又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 一 基因工程的原理 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 结果 实质（原理） 优点 理论基础（成功原因） 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 定向改造生物的遗传性状 基因重组 打破生殖隔离； （一）基因工程的概念 定向地改造生物 所有生物的DNA分子的基本结构相同，生物界共用一套遗传密码 思考：要把家蚕的合成蚕丝蛋白的基因“嫁接”到细菌上，关键步骤是什么？ 关键步骤一：怎样提取合成蚕丝蛋白的基因？ 关键步骤二：怎样将基因运输到细菌体内？ 关键步骤三：怎样将基因与运载工具连接起来？ 基因的剪刀——限制性内切酶 基因的针线——DNA连接酶 基因的运载工具——基因的运载体 (DNA) （二）基因操作的工具 基因的剪刀——限制性核酸内切酶 基因的针线——DNA连接酶 基因的运载工具——基因运载体 1、基因的剪刀——限制性核酸内切酶（简称限制酶） （1）存在： 限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶，能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性核酸内切酶。 观察各限制酶识别并作用的核苷酸序列，看看它有何特点？ （2）特点： ①只能识别一种 特定的核苷酸序列 ②只能在特定的 位点上切割DNA分子 特异性和专一性 　 黏性末端　　　　 黏性末端 EcoRI限制酶的切割 (3)限制酶切割的是什么化学键？ 磷酸二酯键 切割位点 (3)限制酶切割的是脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，而不是碱基之间的氢键 （注意与解旋酶的区别） 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸， 它们之间正好互补配对 这样的切口叫黏性末端。 (4)切割的结果：一般能产生黏性末端，也可能产生平末端。 GAATTCCGTAGAATTCGGATT 尝试写出下列序列受EcoRI限制酶作用后的黏性末端 CTTCATGAATTCCCTAA GAAGTACTTAAGGGATT CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA