分子诊断在乙肝诊疗中应用（讲座）.pptVIP

qHBsAg预测NUCs疗效 NA治疗，qHBsAg下降缓慢且与HBV DNA下降的水平无相关性 但在NA治疗期间，尤其是在获得VR后，HBsAg 快速下降，预示着患者长期治疗后可获得HBsAg清除 每6-12月HBsAg定量可以作为NA治疗中的监测指标 亚洲人群中（B、C型），qHBsAg100IU/ml者，停药后复发的可能性小，可据此作为停药依据，但需要更多的多中心研究来证实 本研究是文献回顾，数据也是来自回顾 从HBV复制周期与看NUC对HBsAg的清除 NUC治疗阻断逆转录，选择性地抑制HBV病毒颗粒的合成；但由于cccDNA 的长期存在，不能降低HBsAg水平 目 录 乙肝检测指标作疗效预测的意义 乙肝检测指标作治疗终点的意义 各国指南对乙肝治疗终点和目标的描述 乙肝检测指标在诊疗中的应用 高灵敏度HBV DNA定量 （内标法） 感染早期判断 病情监测 药物疗效判断 用药方案指导 停药判断 HBV基因分型 病情预后发展评估 抗病毒药物疗效判断 cccDNA检测 确定病毒清除 判断停药时间 判断肝外组织感染 乙肝耐药全基因测序 （测序法） 抗药监测 治疗药物选择 HBsAg定量检测 （全定量） 乙肝两对半定量检测 疗效预测 疗效检测 乙肝检测指标作治疗终点的意义 高灵敏HBV-DNA定量在临床中的应用 开始治疗 治疗12周 治疗24周 基于HBV DNA、ALT水平和疾病发展阶段 是否存在原发性无应答 （HBV DNA较基线降低不到1 log10） 完全病毒学应答 60 IU/ml 继续治疗 每6个月监测HBV DNA 部分病毒学应答 60-2000 IU/ml 加其他药物治疗 每3个月监测HBV DNA 不充分病毒学应答 2000 IU/ml 改用或加用更强药物 每3个月监测HBV DNA 治疗终点 达到持续的病毒学抑制 （用最灵敏方法检测不到HBV-DNA ） 常规定量PCR检测下限偏高，无法准确评价治疗应答情况及判断治疗终点，使得治疗后临床复发率高 HBV DNA （0-20 IU/ml） HBV DNA （500 IU/ml） 更准确检测低浓度病毒 判断治疗终点，避免假阴性 HBV DNA （20-1.7×108 IU/ml） HBV DNA （103-107 IU/ml） 线性范围更宽，可以更准确地检测低浓度与高浓度的HBV DNA 高灵敏度定量 常规定量PCR 优势 检出限 线性范围 目前监测HBV-DNA中存在的问题 “HBV DNA定量检测需要高灵敏度方法 （最低值为20 IU/ml以下）” “一个能够侦测10-15 IU/ml 的real-time PCR方法是最好的疾病监测的工具” 2011 EASL指南 －－要进行高敏感度HBV DNA定量检测 COBAS HBV 430例血浆 Real time PCR HBV1000 copies/mL 222例（51.6%） 20 IU/mL 208/430(48.4%) 20 IU/mL 2.0 test 经COBAS TaqMan HBV 检测后，共有158/430（36.7%）病毒载量 1000 copies/mL Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan HBV病毒载量系统对慢性乙型肝炎抗病毒治疗监测的意义 李敏伟 沃健儿 倪淑君 王 静 李兰娟 浙江大学附属第一医院传染病诊治国家重点实验室Data on file 普通乙肝病毒定量检测假阴性率高达36.7% 64/222（28.38%）E+02 copies/mL 107/222（48.20%）E+03 copies/mL 35/222（15.77%）E+04 copies/mL 7/222（3.15%）E+05 copies/mL 2/222（0.9%）E+07 copies/mL 7/222（3.15%）E+06 copies/mL 华西医院采用COBAS TaqMan HBV检测20例治疗48周普通PCR报告HBV DNA1000 copies/ml样本的结果分析 20例患者组成特点 --9例服用ETV、11例服用ADV（48周） --10例eAg阳性、8例eAg阴性患者、 2例1,5阳患者 检测试剂 病例数 HBV DNA分布范围 国产HBV 20例 1000 copies/ml CAP/CTM HBV 11例 8例* 1例 Target Not Detected 103~104 copies/ml 104~105 copies/ml *包括1例服用ETV患者 普通PCR法 “假阴性”率高达45% (9/20) 高灵敏度HBV-DNA定量 帮助临床医生更准确监测疗效及判断治疗终点 高灵敏度HB