生化3仪器分析的反应模式和实验原理课件.pptVIP

生化3 仪器分析的反应模式和实验原理 检测方法 1.终点法：是最常用的分析方法。 优点：吸光度信号变化大，吸光度稳定，对温度、时间、显色试剂的用量和配方要求不高，重复性好，精密度高。 缺点：反应时间长，减低了仪器的检测效率。 终点法又分为一点终点法、二点终点法和多点终点法。 一点终点法： 仪器将生物样品与相应的试剂在反应系统内充分混合，在一定的温度下，经过一定时间的反应，通过比色系统读取反应平衡后在特定波长下一定时间的吸光度值，由微处理系统计算测定结果。 二点终点法： 仪器首先将生物样本与所用试剂1充分混合，在一定温度下反应一定时间，读取特定波长下的吸光度值，再加入试剂2启动反应，在反应达到平衡时读取第二个吸光度值。或使用单一试剂在样本与试剂充分混合后的最初时间读取吸光度值，再在一定温度下反应一定时间后读取第二个吸光度值。最后由仪器维持理系统对两个吸光度值进行处理，计算检测结果。 多点终点法： 在一个反应系统内一次进行多个反应的终点反应，只有个别仪器具有此功能。 2.固定时间法：在时间—吸光度曲线上选择两个吸光度测定点，此两点既非反应初始吸光度亦非终点吸光度，仪器微处理系统利用两个吸光度差值计算结果，也称两点法。主要用于解决某些反应的非特异性。 3.连续监测法：酶活性测定有两点速率