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生物奥赛——生化实验 2010 实验内容 蛋白质含量测定 酱油中氨基酸含量测定 脲酶鉴定 蛋白质含量测定 实验原理 蛋白质含量测定有许多方法，考马斯亮蓝(G-250)比色测定是最灵敏的方法之一。考马斯亮蓝可与蛋白质通过氢键结合生成复合物，结合符合比尔定律。结合前颜料为棕红色，结合后为蓝色，最大吸收由465nm转变成595nm。通过测定595nm处最大光吸收的增加，可知结合蛋白质的量。 蛋白质和染料结合是一个快速的过程，两分钟内即可完成，并可稳定1小时，测定范围在10～100ug/ml蛋白质之间为线性范围，去污剂有颜色干扰，可影响比色结果。 本试验是利用考马斯亮蓝与不同量蛋白质的标准曲线来目测未知蛋白质溶液的蛋白质含量，并计算未知溶液的蛋白质含量。 药品试剂：考马斯亮蓝；标准蛋白液 实验方法及步骤 1. 标准曲线 另取7支干试管，编号，分别吸取上述溶液1ml加入试管中，再向其中分别加入1ml蒸馏水，2ml考马斯亮蓝试剂，摇匀。 2. 未知样品蛋白质含量的测定 实验结果与分析 酱油中的氨基酸含量测定 实验原理： 本实验用聚酰胺薄层层析，在乙酸溶液中展层，再用茚三酮显色，以标准谷氨酸为对照，观察不同酱油中的氨基酸的含量变化，在一定程度上它反应了酱油的质量。样品在乙酸溶液中展层,由于不同分子极性不同,分配层析速度和位置不同而分开。展层后，谷氨酸的位置靠近前沿。可看到不