基础化学实验Ⅳ(仪器解析实验).ppt

邻二氮菲分光光度法测定微量铁;岛津1700紫外-可见分光光度计的使用（第一次训练） 紫外可见吸收光谱光谱的制作（第一次训练） 工作曲线法（巩固训练）;一、实验目的 二、实验原理 三、实验步骤 四、结果处理 五、思考题 六、实验延伸;一、实验目的; 根据朗伯－比耳定律：A=εbc，当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。 用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。; 在pH=2～9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的桔红色配合物Fe(phen)32+： 此配合物的lgK稳=21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104 L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH2OH·HCl)将Fe3+还原为Fe2+，其反应式如下： 2Fe3++2NH2OH·HCl→2Fe2++N2+H2O+4H++2Cl- 测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜。用邻二氮菲可测定试样中铁的总量。;仪器：分光光度计(UV1700型) ，50ml容量瓶7个，10ml移液管4支。; 100μg·mL-1铁标准溶液: 准确称量0.8634 g NH4Fe(SO)4·12H2O于烧杯中，加入10 mL 浓HCl和少量水，溶解后转移至1 L容量瓶中，以水稀释至标线，摇匀。用时稀释至10μg·mL-1。 0.15%邻二氮菲水溶液，10%盐酸羟胺溶液（新配），1 mol·L-1乙酸钠溶液，1 mol·L-1 NaOH溶液，6 mol·L-1 HCl（工业盐酸试样）;容量瓶编号;1.启动计算机，打开主机电源开关，开启主机电源，分光光度计进行自检和初始化。初始化完成后，打开主程序，联接主机和计算机。 2. 在工作界面上选择测量项目（光谱扫描，光度测量），本实验选择光谱扫描，设置测量条件（扫描范围，测量波长等）。 3. 将空白放入测量池中，点击START扫描空白，点击ZERO校零。 4. 标准曲线的制作。;吸收曲线的绘制和测量波长的选择： 取上述6号溶液,用1cm比色皿,以试剂空白为参比溶液,设置扫描范围400---600nm,扫速快速, 点击开始进行扫描，??描结束后得吸收曲线，从吸收曲线上选用最大吸收波长为分析波长。;2. 标准曲线的绘制： (1)标准曲线的制作:取1-6号溶液,用1cm比色皿,以试剂空白为参比溶液,在所选波长下测量吸光度。然后以波长c为横坐标，吸光度A为纵坐标，作图，得标准曲线曲线。 (2)试样测定: 在相同条件下，测定样品的吸光度。;1. 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择测量的最适宜波长条件。 2. 以铁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。根据试样的吸光度，从由线性回归方程求得含量或在工作曲线上查得含量，计算铁样品中的含铁量（以μg/mL表示），计算测量结果的平均值和相对偏差。 ;注 意 事 项;六、思考题;1、双波长分光光度法的原理：当吸收光谱重叠的a、b两组分共存时，若要消除a组分的干扰测定b组分，可在a组分的吸收光谱上选择两个吸收度相等的两波长λ1和λ2，测定混合物的吸光度差值。然后根据ΔA值计算b的含量。双波长分光光度法的关键是正确选择两波长λ1、λ2，要求被测组分D在两波长处的△A足够大，而干扰组分G和背景在两波长应有相同的吸光度(△A=0)。为满足上述要求，一般是将λ2选在待测组分的最大吸收波长，λ1是选在干扰组分等吸收波长。 2、怎样用双波长分光光度法测定水样中的全铁（总铁）和亚铁的含量？试拟出一简单步骤。