NAA浓度对中华芦荟叶片组织培养影响的研究.docVIP

不同浓度NAA诱导芦荟叶片愈伤效果的研究 王玉梅 广东第二师范学院 生物系 09园艺技术 广州 510303 摘要：采用浓度差的方法，考察了0mg/L、0.5mg/L、1mg/L、1.5mg/L四种浓度的NAA对中华芦荟叶片愈伤组织的诱导效果的影响。结果表明：在MS+0.2mg/L6-NA基本培养基中，1mg/L的NAA对愈伤的诱导效果最好。 关键词：芦荟（Aloe） 叶片 愈伤组织诱导 芦荟（Aloe）为百合科芦荟属植物，含有七十多种对人体有益物质，在医学、食用、美容等多方面都具有广泛的实用价值【1】。芦荟的繁殖一般采用扦插和分株繁殖，然而这些方法受繁殖基数的限制，初期繁殖速度较慢，而且容易是病毒积累，影响植株生长，甚至退化【2】。采用叶片经愈伤组织诱导再促进长芽、生根的培养方法，不仅可以为生产提供一条在短期内繁殖出大量种苗的途径，以加速新品种的推广，而且还可以解决大规模快速繁殖中材料不足的问题。该试验以中华芦荟为材料，采用浓度差的方法，探究不同浓度NAA在MS+0.2mg/L6-BA基本培养基中对中华芦荟叶片愈伤组织诱导效果，以期获得最佳浓度。 1 材料与方法 1.1 实验材料 中华芦荟的幼嫩叶片采自广东第二师范学院生物楼6楼顶 1.2 实验方法 1.2.1 培养基的配置 以MS为基本培养基，其中添加0.2mg/L的6-BA和4个不同浓度的NAA组合（见表1），蔗糖3%，琼脂1%，PH5.8,培养基经高温杀毒30min备用。 表1 培养基与激素组合 组名 瓶数 培养基 6-BA(mg/L) NAA(mg/L) A 10 MS 0.2 0 B 10 MS 0.2 0.5 C 10 MS 0.2 1 D 10 MS 0.2 1.5 1.2.2 材料灭菌处理 取芦荟幼嫩叶片，用自来水洗干净再在流水下冲刷3h, 再用75%的酒精进行表面消毒30s，然后用0．1％的升汞液消毒9min，最后用无菌水冲洗7～8次，洗去植物表面的升汞残液，放人无菌培养皿中，用无菌滤纸吸干水分备用。 1.2.3 接种 无菌条件下，将消毒后的芦荟切成约0．5～lcm大小的块。接种在培养基上。每瓶接种3—4个外植体。 1.2.4 培养条件 温度25±2 。C，每天光照10～14h，光照强度15OO～ 20001x 2 结果与讨论 2.1 实验结果 2.1.1 观察与数据统计 接种第5d开始出现轻微褐化现象，第10d全部褐化，第15d有54块芦荟叶片出现起动现象；第21d发现B、C组各有一瓶长出类似根的物质，第25d观察证实B组一块外植体长出根和C组两块外植体长出根，截至第47d，A组有13块外植体启动，B组有14块外植体启动，C组外植体有18块有启动现象，D组有17块外植体起动。 表2 不同浓度NAA对愈伤起动的影响 组名 接种块数 褐化率（%） 启动率（%） 长根率 A 18 100 72.2 0 B 24 100 58.3 4.2 C 27 100 66.7 7.4 D 27 100 63.3 0 2.1.2 实验照片 图1 四组褐化现象的比较 图2 外植体直接生根 2.2 实验讨论 2.2.1 NAA抑制芦荟叶片在MS+0.2mg/L6-BA基本培养基愈伤的起动？ 有关资料表明【3】常用生长调节物质对中华芦荟的愈伤诱导效果大小表现为6-BAIBA2.4-DNAA.由表2可知，A组没有添加NAA，其愈伤启动率最高，然而NAA的浓度对愈伤的影响也有一个坡度。最佳的NAA浓度与0.2mg/L的6-BA组合还有待于我们下一组实验的验证。 2.2.2 褐化对实验结果的影响 在实验过程中，发现外植体发生褐化现象严重，褐