第3次_2章.pptxVIP

酶的生产方法;天然菌种;酶的生物合成（enzyme biosynthesis）：通过细胞的生命活动合成各种酶的过程。 酶分为蛋白类酶和核酸类酶，酶的生物合成主要是细胞内RNA和蛋白质的合成过程。 思路： 酶（蛋白质or核酸） 酶的基因能否在特定的条件下表达 该酶所对应的基因;一、酶的生物合成基本原理;;Replication 复制：亲代DNA或RNA在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。 Transcription 转录：以DNA为模板，按照碱基配对原则将其所含的遗传信息传给RNA，形成一条与DNA链互补的RNA的过程。 Translation 翻译：亦叫转译，以mRNA为模板，将mRNA的密码解读成蛋白质的AA顺序的过程。 Reverse translation 反转录：以RNA为模板，在反转录酶的作用下，生成DNA的过程。;Section 1 RNA的生物合成—转录;细胞内RNA的生物功能;(3) 某些RNA具有生物催化活性，属于核酸类酶，在一定条件下，可以催化有关的生化反应。 (4) 各种小分子RNA在分子修饰和代谢调节等方面有重要作用。;转录过程的特点;转录过程的特点;大肠杆菌RNA聚合酶 存在两种形式的活性酶—全酶和核心酶 全酶：负责识别转录的起始位点，并与DNA上的启动子结合，使转录开始。 核心酶：进行核苷酸链的延伸。;The E. coli RNA polymerase holoenzyme consists of six subunits: a2ββ’? σ.;转录过程;RNA前体的加工;(1). 在tRNA的3’-末端加上CCA-OH (2). 在mRNA的5’-末端形成“帽子”结构 (3). 在mRNA的3’-末端连接polyA尾巴 (4). 在tRNA的5’-末端加上甲基鸟苷酸 4. 核苷修饰反应;Section 2 蛋白质的生物合成—翻译;翻译 以RNA中mRNA为模板,按照其核苷酸顺序所组成的密码指导蛋白质的合成的过程。;基因在原核和真核细胞中最终得到表达;遗传密码;原料氨基酸，20种 mRNA是合成蛋白质的“蓝图（或模板）” tRNA是原料氨基酸的“搬运工” rRNA与多种蛋白质结合成核糖体,作为合成多肽链的 “装配机（操作台）”;蛋白质翻译系统示意图;mRNA是遗传信息的载体（载有遗传密码，genetic code），是合成蛋白质的蓝图（模板），它以一系列三联体密码子（codon）的形式从DNA转录了遗传信息。每个密码子代表一个氨基酸。 mRNA占细胞总RNA的5-10%，不稳定，寿命短。;原核tRNA???30-40种，真核有50-60种，含70-90个核苷酸， 并有多种稀有碱基。 tRNA是最小的RNA， 占细胞总RNA 的15%左右，其功能是搬运氨基酸和解读密码子。 tRNA 具有“四环一臂”和“三叶草” 形的典型结构。;;;变偶性或摆动性——反密码子5’端的碱基与 密码子的第三位配对不严格;核糖体是rRNA 与几十种蛋白质的复合体，有大、小两个亚基构成。含有合成蛋白质多肽链所必需的酶、起始因子（IF）、延伸因子（EF）、释放因子（RF）等。rRNA只有4-5种，但占细胞RNA的大部分 。 原核的核糖体（70S）= 30S小亚基 + 50S大亚基 30S小亚基: 16S rRNA + 21种蛋白质 50S大亚基: 23S，5SrRNA + 34种蛋白质 真核的核糖体（80S）= 40S小亚基 + 60S大亚基 40S 小亚基: 18S rRNA + 33种蛋白质 60S 大亚基: 28S，5.8S，5SrRNA + 45种蛋白质;原核生物的两种RNA: 16S rRNA和5S rRNA 的结构;核糖体的结构;核糖体有4个基本功能 1. 容纳mRNA，并能沿着mRNA由5’-3’ 移动，由tRNA解读其密码； 2. 氨基酰位点（A位点），可结合氨基酰-tRNA（AA-tRNA）； 3. 肽酰基位点（P位点），可结合肽酰基-tRNA（肽-tRNA）； 4. 脱氨基酰tRNA的出口位(E位点) ; 5. 肽酰基转移酶中心，是形成肽键的位点等。;氨基酸活化protein activation 肽链合成的起始 initiation 肽链合成的延伸 elongation 肽链合成的终止与释放 termination and release 合成多肽的输送和加工 transport and modification 蛋白质分子的折叠 folding;氨基酸活化生成氨酰-tRNA ;翻译起始时，第一个氨基酸一般是甲硫氨酸，其氨基要甲酰化成为甲酰甲硫氨酸，予以保护。;原核生物肽链合成的起始阶段是在GT