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- 2018-05-31 发布于贵州
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2013届高三生物一轮复习精品课件专题4《DNA和蛋白质技术植物有效成分的提取》(人教选修1)
* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 2.PCR反应的原理、过程及结果 (1)PCR原理。 在一定的缓冲溶液中通过控制温度并提供模板和原料,使DNA复制在体外反复进行。 (2)PCR反应过程。 ①变性:当温度上升到90 ℃以上时,双链DNA解聚为单链,如下图: ②复性:温度下降至50 ℃左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合,如下图: ③延伸:当温度上升至72 ℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,如下图: (3)结果。 ①PCR一般要经历三十多次循环,每次循环都包括变性、复性、延伸三步。 ②两个引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。 1.PCR所用的缓冲液实验前应分装成小份,并在-20 ℃储存。 ?易错提示PCR操作中的注意事项 2.PCR所用的缓冲液配制一定要严格,或者直接购买专用扩增缓冲液。 3.为避免外源DNA等因素的污染,PCR实验中使用的微量离心管、吸液枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌。 4.在微量离心管中添加反应成分时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头必须更换。 【例2】 多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有
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