第三篇 章 酶学2011.09.9 生物化学　.ppt

第二章 酶(enzyme);(1)催化效率高。比非催化高108-1020倍，比其它催化剂高 107-1013倍。;CH2OH;;若酶只对顺反异构体中的一种起催化作用的现象称为几何 异构专一性。;根据酶蛋白的分子特点将酶可分成三类：;表:含相同亚基的寡聚酶;表:含不同亚基的寡聚酶(P326);三、酶的化学组成分类;四、酶的活性中心概念与特点;一些酶活性中心中的残基或基团;His12 ，Lys41，His119;酶活性中心必需基团按照功能分为3类; 在生理条件下，它有一半以广义酸的形式存，另一半以广义碱的形式存在，即既能提供质子，也能接受质子。适合酸碱催化的要求。其中的共轭碱形式中1个N:具有亲核催化能力。;三点附着学说:A.Ogster在研究甘油激酶催化甘油转变为磷酸甘油时提出的。酶具有立体异构专一性，是因为所作用的对映异构体中的底物分子上基团空间排布与酶活性中心基团相匹配时，酶才能作用于这个底物分子。;诱导契合学说：Koshland(1958)认为，酶分子构象是可变的，活性中心结构具有柔性。酶与底物结合时，酶分子受底物诱导，其构象发生变化，以利于催化基团和底物敏感键锲合，形成E-S复合物。;第二节酶的命名和分类;乳酸 +NAD+ = 丙酮酸 + NADH + H+;酶系统命名：;1、氧化还原酶类: 顾名思义是催化氧化还原反应的酶。反应通式： AH2 + B = A + BH2 如乙醇脱氢酶、3-磷酸甘油醛脱氢酶等。;3、水解酶类催化底物的加水分解或其逆反应. 如胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、核酸酶等。该类酶包括9个 亚类，每一亚类表示被水解键的性质，如：;3.1 水解酯键; 3.2 水解糖苷键; 3.3 水解肽键;;6、合成酶类 ;判断下列说法正确与否：;第三节 酶的活力测定与计算;实际应用IU常常很繁琐，人们往往采用习惯活力单位。; 计算举例：现有1g淀粉酶制剂（干粉末），用蒸馏水溶解并定溶至1000ml，从中吸取0.5ml测定该酶活性，测定得知 5min分解0.25g淀粉。计算每g酶制剂（干粉末）所含的淀粉 酶活力单位数；经测定酶液蛋白氮为0.04mg/ml,计算淀粉酶 比活力为多少？（淀粉酶活力单位规定为：在最适条件下，每小时分解1g淀粉的酶量为1个活力单位）。;二、比活力;酶比活力=;四、酶反应速度概念;CH2-CH2-C-OCH2-CH3;第四节酶促反应动力学;产物P的生成速度代表整个酶催化的反应速度。而产物的生成速度取决于[ES]。因此整个酶反应的速度取决于[ES]大小。;二、米氏方程的导出;故ES生成速度只与反应E + S ? E-S 有关。因此：;K1;V=K3[ES];Vm?[S];Km 含义： 就是当酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度，单位：mol/L或mmol/L。;(二)米氏常数的意义;天然底物;3.从Km的大小可以知道正确测定酶活性时所需底物浓度。;Km、 Vm的确定，主要依据实验结果计算。;第五节影响酶作用的因素;一、温度对酶反应速度的影响;1 2 3 4 5 6 7 8 9 10;1.pH对酶分子本身稳定性有 影 响；过酸或过碱，酶变性失活。 2.pH对酶分子活性中心外必需基团解离程度的影响； 3.pH对底物分子解离状况的影响；最适pH时酶活性中心必需 基团解离状态和底物解离状态最有利于两者的作用，故酶 的活性最高。;激活剂 按其分子量大小可分为以下三种:;2.一些小分子的有机化合物 ;4.酶原与酶原激活系统;S;特点及意义：酶原激活是生物的一种调控机制。激活酶原的酶具有组织特异性，因此，酶原只有被运送到一定的组织后才能受相应的酶作用而被激活。这种方式有利于调节和对组织起保护作用。消化类、血液凝固系统等的酶多属此类酶。;1．不可逆的抑制作用 特点：E～I共价结合，E失活，不可逆。;(2)有机磷化合物 如有机磷农药，敌敌畏，敌百虫等，能 与酶(如乙酰胆碱酯酶)活性中心上的丝氨酸以共价键结合而 使酶丧失活性。抑制剂对胆碱酯酶抑制作用。;(3)氰化物和一氧化碳 这些物质能与金属离子形成稳定的络合物，而使一些需要 金属离子的酶活性受到抑制。如含铁卟啉辅基的细胞色素 氧化酶。;(1)竞争性抑制作用(competitive inhibition) ;(2)非竞争性抑制作用(nocompetitive inhibition) ;E + S → ES → E + P;竞争性抑制：当抑制剂浓度增加时，Km减小，随底物浓度增加又会逐渐恢复；非竞争性抑制：抑制剂浓度增加，Km不变，随底物浓度