《导与练》一轮复习高效信息化课堂 第讲 从生物材料中提取某些特定的成分9.pptVIP

第39讲　从生物材料中提取某些 特定的成分 [最新考纲] 1.从生物材料中提取某些特定的成分　2.DNA的粗提取与鉴定 考点突破 知识梳理 知识梳理·温故串知 重温教材 夯实基础 一、DNA和蛋白质技术 1.DNA的粗提取与鉴定 (1)提取原理 DNA与杂质的溶解度不同,DNA与杂质对酶、高温、洗涤剂的 不同。 (2)实验设计 ①材料的选取:选用DNA含量相对较高的生物组织,如鸡血、菜花、洋葱等。 ②破碎细胞(以鸡血为例):鸡血细胞液,加 ,用 搅拌,用 过滤,收集滤液。 耐受性 蒸馏水 玻璃棒 纱布 ③去除杂质:利用DNA在不同浓度的 中溶解度不同,通过控制 的浓度去除杂质。 ④DNA析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的 (体积分数为95%)。 (3)DNA的鉴定 将DNA溶解在5 mL 物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中,加入4 mL的 ,沸水浴中加热5 min,溶液变成蓝色。 2.多聚酶链式反应扩增DNA片段 (1)PCR原理:在一定的缓冲溶液中提供 ,分别与两条模板链相结合的两种 ,四种脱氧核苷酸,耐热的 ,同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。 NaCl溶液 酒精溶液 二苯胺试剂 DNA模板 引物 DNA聚合酶 溶液 (2)结果 ①PCR一般要经历 多次循环,每次循环可以分为 、复性和 三步。 ②两引物间固定长度的DNA序列呈 扩增(即2n)。 3.血红蛋白的提取和分离 (1)常用的分离方法: 法、电泳等。 (2)基本原理 ①凝胶色谱法:是根据 分离蛋白质的有效方法。 ②电泳:利用待分离样品中各种分子 的差异以及分子本身的大小、 的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。 三十 变性 延伸 指数 凝胶色谱 相对分子质量的大小 带电性质 形状 (3)血红蛋白的分离过程 样品处理:红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液 粗分离:用 法除去样品中相对分子质量较小的杂质 纯化:用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化 纯度鉴定:由 法来测定蛋白质的相对分子质量, 即对血红蛋白进行纯度鉴定 透析 聚丙烯酰胺凝胶电泳 【思维激活】 用猪的血液与用鸡的血液提取血红蛋白哪个效果更好? 提示:用猪的血液;因为猪的红细胞无细胞核,结构简单、血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白。 二、植物有效成分的提取 1.植物芳香油的提取 (1)植物芳香油的主要化学成分:萜类化合物及其衍生物;具有很强的 性。提取方法有蒸馏、 和萃取等。 挥发 压榨 2.胡萝卜素的提取 (1)胡萝卜素性质:不溶于 ,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机 溶剂。 水 (3)鉴定方法: 。 纸层析法 建网络图 考点突破·悟法提能 核心归纳 重点突破 DNA和蛋白质技术 考点一 分离DNA、PCR技术、分离蛋白质的比较 剖析考点 为蛋白质的研究和利用提供了原材料 解决了DNA研究中材料不足的问题 为DNA研究打下基础 实验 意义 相对分子质量不同的蛋白质得以分离 获得大量DNA 获得较纯净的DNA 实验 结果 样品处理→凝胶色谱操作 变性→复性→延伸 选取材料→破碎细胞释放DNA→除杂→DNA析出与鉴定 实验 过程 依据相对分子质量的大小不同来分离蛋白质 利用DNA热变性原理体外扩增DNA DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同,且不溶于冷酒精 实验 原理 分离蛋白质 PCR技术 分离DNA 【典例1】 (2014·连云港模拟)红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的功能主要是由血红蛋白完成的,血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2。我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。 根据材料回答下列问题。 (1)实验前取新鲜血液,要在采血器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是　 。? (2)在对样品进行处理时,主要包括　　　　　　　　、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤。其中透析技术的原理是　 。? (3)同学甲利用琼脂糖凝胶电泳法将得到的蛋白质进行分离,在电泳过程中,影响蛋白质迁移速率的因素包括蛋白质分子的　　　　　、　　　　　/　以及分子的形状等。? (4)同学乙利用凝胶色谱法进行血红