华根霉脂肪酶非水相中酶促转化失水山梨醇单油酸酯の研究.pdfVIP

gl量 —————————————————————————————————————————一 华根霉脂肪酶非水相中酶促转化失水山梨醇单油酸酯的研究 摘要 本论文以选择适于非水相催化合成Span80用脂肪酶为基本目的和出发点，对适于非水 相催化合成Span80用脂肪酶的选择、纯化及相关酶学性质、月旨肪酶的固定化、固定化脂肪 酶合成Span80的反应系统及产品品质分析进行了研究。f，具体研究内容如下： t 1．经比较脂肪酶的分解活力与合成活力的关系，发现脂肪酶的分解能力不能代表合成能力。 在酶形式相同的条件下，相同分解活力下的合成活力可以作为评价脂肪酶合成能力的标 准，以此标准确定了以固定化华根霉脂肪酶合成Span80：对华根霉胞外酶进行了粗纯 化，对全细胞脂肪酶和胞外酶的水解酶学性质(最适pH、温度，温度、pH稳定性)和合 成酶学性质(最适pH、温度，最适反应体系含水量)进行了研究。 2．对不同的固定化方法和圃定化载体进行了研究，发现以溶液吸附、硅胶G为载体的固定化 方法最好。对硅胶G溶液吸附华根霉脂肪酶的固定化条件(固定化时间、温度、酶液 pH、加酶量)及固定化酶的水解酶学性质(最适pH、温度，温度、pH稳定性)和合成酶 学性质(最适pH、温度，最适反应体系含水量、有机相中的稳定性)进行了研究。 3．对固定化酶在非水相中催化合成Span80进行了系统研究。主要内容如下： 1)比较了不同的反应体系对Span80酯化率的影响，以无溶剂体系最好。对影响固定化酶 ℃时反应有较高的酯化率：酸醇比为1：2时酯化率和单酯含量均较高：反应体系以不加 水为好，如果除去反应产生的水。酯化率更高，由除水前的36．6％升至86．3％，除水方 式以真空蒸发最好，加吸水剂如分子筛、无水Na：s0。基本没有效果。 (复合酶)使用进行了研究，确定了两酶的加酶量分别是ANL为0．01259／g失水山梨醇， l司定化酶为lOu合成活力／g失水山梨醇，反应温度50。C，酸醇比为1：2，在此条件下反应 10批，酯化率由95．8％降至89。o％，单酯含量比较恒定。 品级Span80和进El ICI产品)相比，复合酶合成的产品单酯含量高，色度低。经中国 药科大学在软膏剂和复合乳剂中的应用实验发现，复合酶合成的Span80的乳化性能明 显好于化学合成的产品。户、一。 关键词：脂肪酶固定化非水相失水山梨醇单油酸酯 ． from Monooleate LipaseRhizopus by ofSorbitan Catalyzed Synthesis in Media chinensis Nonaqueous Abstraet 一，th to Sorbitan to a used Themain is select synthesize purposf％search lipase well media．The researchwere nona