VEGFC和VEGFR在乳腺癌中的表达及与淋巴结转移的关系.docVIP

　　VEGFC和VEGFR3在乳腺癌中的表达及与淋巴结转移的关系 作者：汪蕊，陈睿，杨婉华，马湘一，王世宣，卢运萍，马 丁 【摘要】 目的 探讨VEGFC及其受体VEGFR3在乳腺导管癌中的表达及与淋巴结转移等临床病理指标的相关性。方法 采用免疫组化方法，检测60例乳腺导管癌及邻近正常组织中VEGFC和VEGFR3表达，并将表达结果与淋巴结转移情况及临床病理特征进行统计学分析。结果 乳腺导管癌中分别有78％和83％的VEGFC、VEGFR3阳性表达，而癌旁及正常乳腺组织散在性弱表达或无表达。VEGFC在淋巴结转移组表达评分中位数为6，而在非淋巴结转移组评分中位数为1，差异有极显著性（Plt;0.01）。VEGFR3在乳腺癌淋巴结转移组与淋巴结非转移组表达评分中位数分别为6.0、2.0，差异亦有极显著性（Plt;0.01）。结论 VEGFC与VEGFR3在乳腺癌的侵袭进展及区域淋巴结转移方面可能起重要作用。 【关键词】 VEGFC； VEGFR3； 乳腺导管癌； 淋巴结转移； 免疫组化 Expression of VEGFC and VEGFR3 in Breast Cancer and the Relation phatic Metastasis Key munohistochemistry； Lymphatic metastasis 淋巴道转移是乳腺癌转移最主要的方式之一，且淋巴结的转移状态是决定预后的关键因素，但淋巴结转移的分子机制并未完全阐明。近年来人们发现血管内皮生长因子C(Vascular Endothelial GroRichardson分级法，级12例，级26例，级22例。 1.2 研究方法及试剂 兔抗人VEGFC、VEGFR3多克隆抗体购自Santa Cruz 公司；免疫组化染色试剂盒及DAB试剂盒，购自北京中山生物有限公司。石蜡块制成4μm厚的组织切片，操作按试剂盒说明（SP法）进行。行微波抗原修复，一抗工作浓度均为1100。PBS缓冲液代替一抗以及正常乳腺组织作阴性对照。 1.3 结果判定 染色后切片由二名有经验的病理医师阅片判读，细胞胞浆染色呈棕黄色颗粒为VEGFC, VEGFR3染色阳性细胞。采用半定量评分系统，依据阳性细胞的密度及面积的评分相乘结果进行判读。染色密度设为0～3分：0为无信号；1为弱信号；2为中等强度染色；3为强染色。染色面积也设为0～3分：0为无阳性细胞；1为阳性细胞数少于1/3；2为阳性细胞数在1/3～2/3范围间；3为阳性细胞数大于2/3。每张切片均在×200倍下，在癌灶及相邻正常组织内随机选取10个区域评分统计[1]。 1.4 统计学分析 采用Mann分期有关，且～期患者的评分显著高于～期患者，VEGFC和VEGFR3的P值分别为0.024、0.041，均有统计学差异。二者与年龄、病理分级、ER、PR均无明显关系。VEGFC与VEGFR3表达均阳性42例，VEGFC阳性VEGFR3阴性5例，相关分析表明两者有明显相关性(Plt;0.01)，而其他指标间未见明显相关，见表1、2。表1 VEGFC[VEGFR3表达与临床病理特征的关系3 讨论 现今已有愈来愈多的研究聚焦于淋巴管的形成和转移的分子机制，其中血管内皮生长因子C（VEGFC）与其受体VEGFR3是研究的热点之一。VEGFC是血管内皮生长因子（VEGF）家族的新成员，它是一种针对淋巴管内皮细胞的有丝分裂原,双重转基因小鼠实验证明，VEGFC能诱导淋巴管生成，并介导肿瘤细胞播散和区域淋巴结转移[2]。VEGFC和受体VEGFR3结合后，通过MEK/ERK和PI3激酶/Akt途径引起淋巴管内皮增生，并可能改变原有的和新生的淋巴管内皮的通透性以及肿瘤细胞和胞外基质的粘附性；同时淋巴管数目增多，使瘤细胞接触淋巴管的机会增多，也促进肿瘤的转移[3，4]。近年来发现VEGFC及VEGFR3与头颈部肿瘤、胃癌、大肠癌、前列腺癌、宫颈癌等恶性肿瘤的淋巴管侵犯及淋巴结转移有关,并且是独立的预后不良因素[4，5]。 我们的研究发现，VEGFC、VEGFR3分别在78％、83％的乳腺导管癌中表达，且呈不同的强度，淋巴结转移组显著性强于无淋巴结转移组，而在癌灶邻近的乳腺正常组织中表达明显减弱。这提示在从正常组织向癌的转变过程中，VEGFC和VEGFR3表达是上调的，并与淋巴结的区域转移密切相关。两者表达水平的上调可能在肿瘤淋巴管的生成及淋巴转移过程中起到了重要的作用。VEGFR3存在于恶性乳腺癌细胞内，这与最近的研究发现VEGFR3存在于肿瘤细胞株及实体肿瘤相一致[6、7]。这也使我们置疑VEGFR3作为淋巴管标记物的特异性[8]。同时恶性肿瘤上皮细胞自身表达VEGFR3并与VEGFC显著相关（Plt;0.01），提示V