第六章__芳酸及其酯类药物分析.pptVIP

2、高低浓度对比法（主成分自身对照法） 先配制一定浓度的供试品溶液，然后稀释一定倍数得到另一低浓度溶液，作为对照溶液。将两种溶液点样，展开后，比较所得斑点。 供试品溶液中杂质斑点的颜色不得深于对照溶液的主斑点（有的还规定供试品溶液杂质斑点个数不得超过几个）。 ⊙氯贝丁酯 血浆与血清的区别 全血的制备 生物样品的贮存与处理 冷藏—冰箱(4℃)中短期保存(1~2d) 冷冻—冷柜(-20℃)或低温冷柜(-80℃) 中长期保存 冷藏或冷冻时限经稳定性考察后确定 血样 采集后及时分离血浆和血清（≤2h），分离后再贮存 —若不予先分离，血凝后冰冻保存，则因冰冻有时易引起细胞溶解，会阻碍血浆或血清的分离 —置硬质玻璃试管中完全密塞后保存 尿样 采集后应立即测定，若不能立即测定，加入防腐剂后保存 常用防腐剂：甲苯、二甲苯、氯仿、醋酸、浓盐酸等 甲苯在尿液表面形成薄膜 醋酸改变尿液酸碱性抑制细菌的生长 保存时间为24~36h(4℃)或长期(-20℃) 唾液 为阻止酶催化生成粘蛋白，应在4℃以下保存 —保存过程中放出二氧化碳而使pH升高，测定唾液pH时应在取样的当时为好 —冷冻保存唾液时，解冻后有必要将容器内唾液充分搅匀后再用，否则测定结果会产生误差 注意事项： 1．冷冻的样品测定时，需临时解冻。解冻后的样品应一次性测定完毕，不应反复冻融 2．如果采集的样品不能一次性测定，则应以小体积分装贮存，每次按计划取一定数量进行测定 二、尿中丙磺舒的固相萃取净化-高效液相色谱分析法 1. 预处理方法 C8固相萃取柱,先用水洗去生物基质,甲醇洗脱药物和内标物 2. 测定方法 离子抑制色谱法,梯度洗脱,内标法定量 三. HPLC法测定人血浆中布洛芬含量1. 预处理方法:血浆+甲醇去蛋白2. 测定方法:加预柱,离子抑制色谱法,内标法定量 C18 甲醇-水-正丁醇 (30:20:1) 237nm 内标：苯甲酸 色谱条件 血清样品的处理 HPLC图 血清中ASASA的测定 血清样品100 μl →加入HClO4(30%) 50 μl 、不同浓度ASA SA对照品稀释液、内标(各浓度均为10 μg/ml→混合2min→离心→进样 1 0 3 2 0.溶剂峰　1.ASA　2.内标物　3.SA （二） 水解后剩余滴定法 阿司匹林 USP（24）方法 取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0mL，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/L）相当于45.04mg的C9H8O4。 水 解： 剩余滴定： 反应摩尔比为1∶2 优 点： 消除了酯键水解的干扰 缺 点： 酸性杂质干扰 例如：羟苯乙酯含量测定亦可用此法 （三） 两步滴定法 阿司匹林片、阿司匹林肠溶片 氯贝丁酯 例如阿司匹林片的测定： 用于Aspirin片测定 片剂中有稳定剂 水解产物 水杨酸SA HAc 枸橼酸 Citric acid 酒石酸 Trataric acid 为了避免这些酸类的干扰，采用两步滴定法 取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40mL，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lmL的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。 第一步 中 和 第二步 水解后剩余滴定 水 解： 剩余滴定： 反应摩尔比为1∶2 本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰 片剂含量测定结果的计算 剩余滴定法 二、亚硝酸钠滴定法 具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物 三、 双相滴定法 芳酸碱金属盐 如苯甲酸钠 ChP(2000) 溶剂：水——乙醚 Ch.P 2005用于苯甲酸钠的测定 苯甲酸钠为芳酸碱金属盐，易溶于水；苯甲酸不溶于水，不利于终点的正确判断 因此，利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质，采用双相滴定法 HCl 乙醚(苯甲酸) H2O(苯甲酸钠) 0.5mol/L 25ml 1.5g 50ml 2d 甲基橙 橙红色