pegfpn1dnegfr在裸鼠模型中对胃癌细胞淋巴结转移的抑制作用及其机制研究-inhibitory effect of peg fp n1 dn egfr on lymph node metastasis of gastric cancer cells in nude mice and its mechanism.docxVIP

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2018-06-01 发布于上海
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pegfpn1dnegfr在裸鼠模型中对胃癌细胞淋巴结转移的抑制作用及其机制研究-inhibitory effect of peg fp n1 dn egfr on lymph node metastasis of gastric cancer cells in nude mice and its mechanism

英汉缩略语名词对照英文缩写英文名称中文名称BCABicinchoninic acid双金鸡宁酸BSABovine serum albumin牛血清白蛋白DEPCdiethypyrocarbonate焦炭酸二乙脂DMSODimethyl sulfoxide二甲基亚砜DNEGFRDominant negative Epidermalgrowth factor receptor显性负显性表皮生长因子受体EGFEpidermal growth factor表皮生长因子EGFPEnhanced green fluorescence protein增强型绿色荧光蛋白 EGFREpidermal growth factor receptor表皮生长因子受体 ERKextracellular regulated protein kinases细胞外调节蛋白激酶 FBSFetal bovine serum胎牛血清GAPDHGlyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase3-磷酸甘油醛脱氢酶 HBEGFHeparin-binding EGF肝素结合表皮生长因子HEHematoxylin and eosing stains苏木精 — 伊红染色法kDakilo Daltons千道尔顿Mapkmitogen-activated protein kinase丝裂原活化蛋白激酶mTORthe mammalian target of rapamycin哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白MTTMethyl thiazolyl tetrazolium甲基噻唑基四唑ODOptical density光密度值PBSPhosphate buffered saline磷酸盐缓冲液PCRPolymerase chain reaction聚合酶链反应PI3KPhosphoinositide 3 kinase磷酸肌醇 3 激酶rPMRevolution per minute转/分TGF-αTransforming growth factor-α转化生长因子-α1pEGFPN1-dnEGFR 在裸鼠模型中对胃癌细胞淋巴结转移的抑制作用及其机制研究摘要目的：研究pEGFPN1-dnEGFR转染胃癌细胞后形成的稳定转染细胞株与普通胃癌细胞相比，其在裸鼠模型中对胃癌细胞成瘤能力及淋巴结转移能力的影响及其作用机制。方法：用目的质粒pEGFPN1-dnEGFR，空质粒载体pEGFP-N1分别转染胃癌细胞NCI-N87。用G418筛选出稳定表达转染质粒的细胞株，然后将实验分为3组：NCI-N87细胞未转染组（untreated NCI-N87，UN 组）； NCI-N87 细胞 pEGFP-N1 转染组（ EN 组）； NCI-N87 细胞 pEGFPN1-dnEGFR转染组（DN组）。将3组细胞种植于裸鼠右爪垫（每组6只裸鼠），6周后测其爪垫原位瘤大小及右腹股沟转移淋巴结数目， HE染色求证其是否来源于种植胃癌细胞，免疫组织化学技术检测组织中Akt1、MAPK3蛋白的表达，并用Western blot、Real-time PCR检测3 组细胞Akt1 mRNA、MAPK3 mRNA和Akt1蛋白、MAPK3蛋白表达量多少，比较其差异。结果：测量得出UN、EN、DN组原位瘤的大小分别是1.61±0.21cm3、 1.45±0.27cm3、0.46 ±0.04cm3，与UN、EN组相比，DN组种植瘤的平均体积分别下降71.4%、68.3%，DN组裸鼠的足垫处原位瘤明显小于UN国家自然科学基金（No.2和EN组（P0.05）。UN、EN、DN组右腹股沟淋巴结转移数目分别是6、6、0，统计计算得出DN组淋巴结转移数目明显少于UN、EN组的结论（P0.05）。结论：pEGFPN1-dnEGFR能在裸鼠体内抑制胃癌细胞生长及淋巴结转移，其机制可能是因为其抑制Akt1及MAPK3信号通路。关键词：pEGFPN1-dnEGFR；AKT1；MAPK3；胃癌；淋巴结转移3EFFECTS OF PEGFPN1-DNEGFR ON TUMORIGENESIS AND LYMPHATIC METASTASIS OF GASTRIC CANCER CELLS IN VIVOABSTRACTObjectives: In order to study the influence of downregulation of EGFR in gastric cancer cells on tumorigenic in vivo and lymph node metastasis.Methods: We transferred the plasmid of