水稻广亲和s-,5-候选基因片段反义转化和籼粳不育现象基因差异表达初步研究.pdfVIP

中文摘要 ， ／ {水稻籼粳亚种间普遍存在Fl代杂种不育或半不育的现象，而广亲和品种是一类 与籼粳亚种都亲和的特殊种质资源。水稻广亲和基因的克隆和利用是克服籼粳杂种 不育性、利用亚种间杂种优势的重要途径。 虽然已发现多个育性基因与广亲和性有关，但岛在大多数组合中发挥作用，其 FI代结实率的QTL分析，发现02428的广亲和性受主效基因s_，控制，同时还存在 标记相距2cM。该区段的物理图谱由6个互相重叠的明恢63BAC克隆组成，对覆 亲和基因S尺』(6(丝氨酸／苏氨酸受体蛋白激酶)前体存在较高同源性，因此被确定 为候选基因。＼ 本研究围绕该候选基因和籼粳不育完成了以下工作： 1．对候选基因进行了表达分析，RT-PCR结果显示候选基因在籼粳品种和广亲和品 种的花器官中均有表达： 之间，算构建了以pCAMBIAl301为基础的反义(antisense)转化载体： 3．通过农杆菌介导法将反义构建体转化粳稻品种牡丹江8号，共获得T0代转基因 单株153株，报告基因PCR平均阳性率为93％：以T0代转基因植株与籼稻珍汕97 杂交或Tl代株系的混合花粉授予珍汕97，共得到测交Fl代杂交组合54个，育性 考查发现同一株系内转基因单株的平均结实率相对于未转基因单株没有显著提高； RT-PCR检测到TO代转基因植株中反义片段的表达。 RNA反转录成的cDNA第一链作探针与膜杂交，获得差异表达克隆19个，差异表 达倍数在17—2．5之间，同源性检索发现差异克隆的功能涉及多个生理途径。 关键词：广亲和籼粳不育马反义差异表达 V7 V7 ＼。 Abstract that betweenfDsativa Ithasbeen hybrids indica L．ssp．indica) generallyrecognized and sativa areoftensterileor sterile． japonica(DL．ssp．japonica)rice partially a fertile varietiesaresuch whichcall Fjs Wide-compatibility specialgermplasm produce indicaorwith isolationofthe eitherwith japonicasubspecies．The genecontrolling wilI for the the becruciaI barrierand overcoming wide．compatibility fertility utilizing betweenindicaand valuable heterosis rice． intersubspecmc japonica been Todate locihave discoveredrelatedtowide whileS{ manygene compatibility