《动物性食品卫生理化检验》实验指导-.docVIP

实验一 样品的无机化处理―湿消化法 一、实验目的 1、掌握湿消化法―敞口消化的操作要领。 2、了解湿消化法的优缺点。 二、实验内容 1、试样的制备。 2、样品的消化。 三、实验方法 1 原理 试样加入强氧化性的酸(如浓硫酸、浓硝酸、高氯酸等)，结合加热来破坏有机质，使包含在有机物中的待测成分释放出来，并形成各种步挥发的无机化合物供测定。 2 仪器与试剂 2.1 天平，消煮炉等。 2.2 浓硝酸、浓硫酸。 3 分析步骤 称取5.00g样品，置于消化管中，先加水少许使湿润，加数粒玻璃珠、30mL硝酸，混匀，放置片刻，小火缓缓加热，待作用缓和，放冷。沿瓶壁加入5mL硫酸，再加热，至瓶中液体开始变成棕色时，不断沿瓶壁滴加硝酸至有机质分解完全。加大火力，至产生白烟，待管口白烟冒净后，管内液体再产生白烟为消化完全，该溶液应澄明无色或微带黄色，放冷。 加20mL水煮沸，除去残余的硝酸至产生白烟为止，如此处理两次，放冷。将冷后的溶液移入50mL容量瓶中，用水洗涤消化管，洗液并入容量瓶中，放冷，加水至刻度，混匀。定容后的溶液每10mL相当于1g样品，相当加入硫酸量1mL。 取与消化样品相同量的硝酸和硫酸，按同一方法做试剂空白试验。 四、注意事项 1、加酸进行消化时，应控制好火候。 2、为了减少消化时产生大量泡沫，可在消化前于室温下浸泡过夜。 3、在消化过程中加酸，必须取下烧瓶冷却后缓缓加入。 实验二 动物性食品中总砷的测定―银盐法 一、实验目的 掌握银盐分光光度法（DDC-Ag）的原理，了解本法的操作程序与实验要点。 二、实验内容 样品消化（硝酸—硫酸法）、测定、标准曲线的绘制及结果计算。 三、实验方法 1 原理 样品经消化后，以碘化钾、氯化亚锡将高价砷还原为三价砷，然后与锌粒和酸产生的新生态氢生成砷化氢，经银盐溶液吸收后，形成红色胶态物，与标准系列比较定量。 2 试剂除特别注明外，所用试剂为分析纯，水为去离子水。 2.1 浓硝酸、浓硫酸、浓盐酸。 2.2 无砷锌粒。　　 2.3 碘化钾溶液(150g/L)：贮存于棕色瓶中。 2.4 酸性氯化亚锡溶液：称取40g氯化亚锡(SnCL2·2H2O)，加盐酸溶解并稀释至100mL，加入数颗金属锡粒。 2.5 乙酸铅溶液(100g/L)。 2.6 乙酸铅棉花：用乙酸铅溶液(100g/L)浸透脱脂棉后，压除多余溶液，并使疏松，在100℃以下干燥后，贮存于玻璃瓶中。 2.7 氢氧化钠溶液(200g/L)。 2.8 硫酸(6+94)：量取6.0mL硫酸，加于80mL水中，冷后再加水稀释至100mL。 2.9 二乙基二硫代氨基甲酸银—三乙醇胺—三氯甲烷溶液：称取0.25g二乙基二硫代氨基甲酸银［(C2H5)2NCS2Ag］，置于乳钵中，加少量三氯甲烷研磨，移入100mL量筒中，加入1.8mL三乙醇胺，再用三氯甲烷分次洗涤乳钵，洗液一并移入量筒中，再用三氯甲烷稀释至100mL，放置过夜。滤入棕色瓶中贮存。 2.10 砷标准溶液：准确称取0.1320g在硫酸干燥器中干燥过的或在100℃干燥2h的三氧化二砷，加5mL氢氧化钠溶液(200g/L)，溶解后加25mL硫酸(6+94)，移入1000mL容量瓶中，加新煮沸冷却的水稀释至刻度，贮存于棕色玻塞瓶中。此溶液每毫升相当于0.10mg砷。 2.11 砷标准使用液：吸取1.0mL砷标准溶液，置于100mL容量瓶中，加1mL硫酸(6+94)，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1.0μg砷。 3 仪器 3.1 752型分光光度计。 3.2 测砷装置（砷化氢发生器）。 注意：所用玻璃仪器均需以硝酸(1+5)浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用去离子水冲冼干净。 4 测定方法 4.1 样品消化（硝酸—硫酸法） 见实验一的3部分。 4.2 测定 4.2.1 吸取一定量的消化后的定容溶液(相当于5g样品)及同量的试剂空白液，分别置于150mL锥形瓶中，补加硫酸至总量为5mL，加水至50mL。各加3mL碘化钾溶液(150g/L)，0.5mL酸性氯化亚锡溶液，混匀，静置15min。各加入3g锌粒，立即分别塞上装有乙酸铅棉花的导气管，并使管尖端插入盛有4mL银盐溶液的离心管中的液面下，在常温下反应45min后，取下离心管，加三氯甲烷补足4mL。用1cm比色杯，以零管调节零点，于波长520nm处测吸光度，绘制标准曲线。 4.2.2 标准曲线的绘制 　　吸取0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL砷标准使用液(相当0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0μg)，分别置于150mL锥形瓶中，加水至40mL，再加10mL硫酸(1＋1)。 5 计算 式中：X ——样品中砷的含量，mg/kg或mg/L； m1——样液吸光度