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第三章 消毒与灭菌 医学微生物学与免疫学教研室 董海艳 主要内容 概念 物理消毒灭菌法 化学消毒灭菌法 Disinfection 清洁 杀死物体上病原微生物的方法,并不一定杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。 杀死物体上所有微生物的方法。 消毒： 灭菌： Sterilization 抑菌： Antisepsis 抑制体内或体外细菌生长繁殖的方法。 基本概念 防腐： Antisepsis 防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。 不含活菌的意思。 无菌： Asepsis 防止细菌等微生物进入人体或其他 物品的操作技术。 无菌操作： back 一、物理消毒灭菌法 热力灭菌法 ? 辐射灭菌法 ? 滤过除菌法 ? 超声波消毒法 ? 干燥与低温抑菌法 一、物理消毒灭菌法 热力灭菌法 原理：高温使细菌胞内的蛋白质变性，杀 死细菌。 最常用的消毒和灭菌的方法 可以分成干热和湿热两大类-----比较 湿热灭菌与干热灭菌的比较 同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好 原因 1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 2、湿热的穿透力比干热大 3、湿热的蒸汽有潜热 Back ? 焚烧----最彻底的灭菌方法 烧灼----直接用火焰灭菌方法 干烤----加热160-170℃ 2小时 干热灭菌法 高压蒸汽灭菌法 高压蒸汽灭菌器 最有效的灭菌方法 ，121.3 ℃(103.4kPa)，15~20 min 煮沸消毒法 水煮100 ℃ 5min(繁殖体)，1~2h(芽胞) 流通蒸汽消毒法：水蒸汽100 ℃ 15~30min(繁殖体) 间歇蒸汽灭菌法： 反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌 巴氏消毒法： 61.1℃ ～62.8℃ 30min 或71.7 ℃ 15～30s 湿热消毒灭菌法 杀灭致病菌或特定微生物 高压蒸汽灭菌器 Back 二、辐射杀菌法 紫外线 杀菌机理： 波长200~300nm的紫外线具有杀菌作用 干扰DNA的复制与转录 紫外线穿透力较弱 不耐热物品的表面消毒 特 点： 应用范围： 空气消毒 手术室、传染病房、细菌实验室 杀菌机理： 应用范围： 电离辐射 包括高速电子、X射线和 γ 射线 产生自由基，破坏细菌的DNA。 一次性医用塑料制品的消毒 食品的消毒不破坏其营养成分 Back 滤过除菌法 用物理阻留的方法 将液体或空气中的细菌除去,以达到除菌目的 滤菌器 含有微细小孔0.22微米,只允许液体或气体通过, 而大于孔径的细菌等颗粒不能通过 适用范围 血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌 Back 超声波杀菌法 超声波： 大于 2X104Hz的声波。 原理：空腔作用， 裂解细菌 超声破碎仪 Back 低温与干燥 在低温状态下真空抽去水分 用途：保存菌种 冷冻真空干燥法： Back 1、化学消毒剂：具有杀菌作用的化学药品。 2、杀菌机制 （1）使菌体蛋白质变性或凝固: 如重金属离子、龙胆紫、酸碱等 （2）干扰细菌酶系统和代谢：如过氧化氢、碘等，重金属能与细菌酶蛋白上的-SH基接合，氧化剂则可氧化-SH为-S-S基，从而使酶活性丧失，细菌代谢发生障碍，最终死亡。 （3）损伤细菌细胞膜 阳离子表面活性剂（如：新洁尔灭）可与细菌细胞膜磷脂结合，提高膜的渗透作用 酚类化合物（石碳酸）可损伤胞膜，使胞浆内容物外渗、漏出外，还能使细胞膜上的氧化酶和脱氢酶失活，最终导致细菌死亡。 二、化学消毒灭菌法 类别 作用机制 常用种类 酚类 蛋白变性，细胞膜损伤 石炭酸、来苏儿 醇类 蛋白变性 乙醇 重金属盐 氧化、蛋白酶变性 红汞、硫柳汞 氧化剂 氧化酶蛋白 过氧乙酸、漂白粉 表面活性剂 蛋白变性，细胞膜损伤 新洁尔灭 烷化剂 蛋白质和核酸的烷化 甲醛、戊二醛 常用消毒剂种类 化学消毒剂的应用 选用的消毒剂 病人排泄物、分泌物 20％漂白粉，5％石炭酸，2％来苏，作用2h 皮肤 2.5％碘酊，70％乙醇 粘膜 1％硝酸银，0.1％新洁尔灭 厕所阴沟 生石灰、过氧化氢 空气 甲醛、过氧乙酸 手 2％来苏，0.2％过氧乙酸，2％碘酊，70％乙醇 影响消毒剂作用的因素 消毒剂 细菌 环境 种类 浓度 作用时间 菌龄 种类 有机物 温度 酸硷度 选择适当的消毒剂 低毒 价廉 低破坏 易贮藏 方便 有效