地黄饮子含药脑脊液对Aβ.docxVIP

地黄饮子含药脑脊液对Aβ25??作者：谢宁孟菲姚辛敏周妍妍何秀丽【摘要】?目的探讨古方地黄饮子对β淀粉酶Aβ25～35哳所致PC12细胞损伤时即早基因c-f鹇os和c-jun表达的调控作用。方法秆把离体培养的进入对数生长期的PC12夭细胞分为空白组、模型组、VitE脑脊趄液对照组、地黄饮子脑脊液低、中、高剂蝤量组，待24h细胞贴壁后吸去培养液,6组分别加入正常培养液、正常脑脊液、完VitE脑脊液、地黄饮子脑脊液低、中萄、高剂量，加培养液补至等量，37℃孵侄育2h。然后除正常组加入等量培养液外，其他各组加入经老化处理的Aβ25～嘞35，继续孵育24h，然后离心收集细亚胞，提取总RNA。应用RT-PCR二颈步法和琼脂糖凝胶电泳方法测定c-fos和c-jun基因的表达。结果地黄饮子能下调c-fos和c-jun基因的缢表达，并呈一定的剂量依赖性。结论地黄嘿饮子脑脊液能明显降低PC12细胞受A狞β25～35刺激时即早基因c-fos和c-jun的过度反应，说明地黄饮子树能提高PC12细胞对外界不良刺激的应罡激性。【关键词】?地黄饮子脑脊液PC12细胞即早基因Abstract冂:ObjectiveToinvest钡igatetheregulative圾effectsontheexpres貂sionofIEGc-junandc害-fosofDecoctionofrehmanniaeonPC12inj柃uryinducedbyb-amyl绚oid25～35protEin(Aβ25～35).MethodsCult臭uredcellsofPC12wer卸edividedinto6groups:normalgroup,modelgroup,vitaminEgroハup,lowdoseofTCMgro型up,moderatedoseofT嗽CMgroupandhighdoseofTCMgroupswereres烦pectivelyaddedtono浙rmalculturedfluid;熔nomalcerebrospinal蕻fluid,vitEcerebrospinalfluid,lowdose雹ofTCMcerebraspinal琢fluid,moderateandh铮ighdoseofTCMcerebr蟾ospinalfluidinlogg③rowthphase,thenaddūedculturedfluidtoe绦qual,37℃hatched2no羼rmalgroupwasaddedt┯othesamedoseofcult甬uredfluidandotherg兰roupswereaddedtoAβ猪25～35dealedwithagi颃ng(thefinalconcentrationis10μmol/L),傅andthensixgroupswe谂rehatched24hoursla数sttheywerecentrifu比gedtoextractthetot紊alRNA.Theexpressio晕nofc-junandc-fosmeゼasuredbythemethods璧ofRT-PCRandagarose婕gelgroupofDecoctioЪnofRehmanniaecereb君rospinalfluidreduc蟋edtheexpressionofc-junandc-fosgene,a叼ndshowedsomeofRehmanniaecerebrospinaΡlfluidcaneffective褓lyreducethehighres脉ponseofc-junandc-f墙osgeneinPC12cellsi欢njuredbyAβ25～showsthatDecoctionofReh造manniaecerebrospin苈alfluidcanincreasePC12cells?irritab疽ilityforexternalil铩linnervation.Keyw殃ords:DecoctionofRe呼hmanniae;?Cerebroa鲟pinal;?Pheochromoc蕴ytomaderivedcellli个ne(PC12cells);?ImmediateEarlygene属于艄神经嵴源细胞之一的PC12细胞与原代型培养的细胞相比，同源性较好且较易获取蜉，细胞生存时间长,易于观察。而淀粉样矬蛋白在老年性痴呆患者脑中普遍沉积，由杷其诱导的PC12细胞的凋亡模型即为老年性痴呆病的一个较贴近的模型。即早晰基因(Immediateearlygene,IGE)又称快反应基因、原癌制基因(proto-oncogers)藁,该基因家族有包括c-fos和c-j捺un在内的近百个成员。c-fos和c赐-jun在正常情