酶发酵工程.pptxVIP

复制DNA转录逆转录蛋白质RNA翻译复制 第一节 酶生物合成及调节一、酶的生物合成 遗传信息传递的中心法则转录传递给RNA，再由RNA （一）RNA的生物合成--转录(transcription) 定义 以DNA为模板，以核苷三磷酸为底物，在RNA聚合酶（转录酶）的作用下，生成RNA分子的过程。.转录模板 模板链（template strand）反意义链(antisense strand)启动子（promotor) 终止子(terminator)5′3′3′5′DNA编码链 (coding strand)有意义链(sense strand)反意义链:指导转录作用的一条DNA链有意义链:无转录功能的一条DNA链.5’有意义链5’3’3’T C G A G T A CA G C T C A T G反意义链RNA聚合酶C G A G U A CG C A U3’PPiUTPRNA5’GTPATPCTPUTPRNA在DNA模板上的生物合成RNA的转录过程(三步)1.起始2.延长3.终止 起始因子 原核生物的RNA聚合酶(DDRP) E. coli的RNA聚合酶是由四种亚基组成的五聚体（ ?2 ? ?? ?） 启动子（promotor) 终止子(terminator)????RNA聚合酶5?离开3????5?3?3?5?5?5?3?5?起始双链DNA局部解开磷酸二酯键形成延长阶段解链区到达基因终点终止阶段RNARNA合成过程模板链（反义链）有义链解链复链3′RNA-DNA杂交螺旋新生RNA聚合酶的移动方向延长部位5′RNA链的延伸图解（二）蛋白质的生物合成--翻译(translation) 定义 以mRNA为模板，以氨基酸为底物，在核糖体上通过各种tRNA、酶和辅助因子的作用，合成多肽链的过程。酪酪氨酰- tRNA5’反密码AUGGUU UAC ACAmRNA5’3’密码与反密码的碱基配对给 位(P位)受 位(A位)蛋苏大亚基小亚基UGUGUUAUG ACA5’3’ 蛋白质的合成过程 （大肠杆菌） 氨基酸的活化 肽链合成的起始 肽链的延伸 肽链合成的终止与释放氨基酸的活化与转运反应式：氨酰-tRNA合成酶AA + tRNA + ATP氨酰-tRNA+AMP+PPi 对于E.coli而言，肽链合成时的第一个氨基酸都是甲酰甲硫氨酸（fMet）。在核糖体上合成多肽（三阶段）1、起始阶段2、延伸阶段3、终止阶段肽链合成的起始阶段1.mRNA与小亚基结合：形成30S-mRNA-IF3复合物2.AUG与蛋氨酰-tRNA结合： 30S-mRNA-IF3 fMet-tRNA-IF2-GTP fMet-tRNA正好位于mRNA的起始密码子上（AUG）。3.大小亚基结合IF130S起始复合物mRNA小亚基AUG ACA5’3’蛋氨酰tRNA GTP给位受位蛋蛋大亚基UACUACAUG ACAAUG ACA5’3’5’3’GDP+Pi肽链合成的起始阶段肽链合成的延伸阶段1.进位:氨基酰-tRNA进入受位;2.转肽:形成肽键,在转肽酶作用下,给位与 受位结合;3.移位:核蛋白体向3’端移动一个密码子的 位置,空出受位,不断地进位、转肽、 移位,使肽链延长。苏蛋蛋苏UGUUACUACUGUGUUAUG ACAAUG ACA3’GTP GDP+Pi5’3’5’起始复合体Mg+K+进位蛋蛋苏苏UGUUACUGUGUUGUUAUG ACAAUG ACA3’5’5’3’GDP+PiGTP移位转肽肽链合成的终止阶段1.出现终止密码并与终止因子结合;2.肽键水解,多肽释放;3.tRNA,mRNA,大小亚基解离. 终终UACUACAUG UAAAUG UAA5’5’3’3’肽链终5’UAC3’UACAUG UAA终5’3’二、酶生物合成的调节定义：通过调节酶合成的量来控制微生物代谢速度的调节机制，是在基因转录水平上进行的。意义：通过阻止酶的过量合成，节约生物合成的原料和能量。 操纵子——基因表达的协同单位结构基因（编码蛋白质, structural gene, S）操纵子操纵基因（operator gene, O）控制部位启动子（promotor gene, P）（一）基因调控理论 Jacob and Monod的操纵子学说（operon theory） 基因操纵子调节系统示意图 调节基因 启动基因 操纵基因 结构基因 DNA 转录 （-） RNA聚合酶 （+） 转录 翻译 mRNA 翻译 阻遏蛋白 蛋白质 诱导剂 操纵子控制区 信息区　 调节基因(regulator gene)： 可产生一种组成型调节蛋白(regulatory protein) （一种变构蛋白），通过与效应物(effecto