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- 2018-06-03 发布于上海
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动物细胞融合与单克隆抗体·件
植物组织培养 VS 动物细胞培养比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞的增殖培养基(半)固体、营养、植物激素液体、营养、动物血清结果培养成植株培育成细胞系(株)培养目的快速繁殖,培育无病毒植株。获得细胞的产物等思考:植物细胞工程中,除了植物组织培养技术外,还有什么技术?过程如何?植物细胞A植物组织培养去 壁原生质体A原生质体B愈伤组织杂种植株去 壁脱分化再分化植物细胞B温故而知新——植物细胞杂交(马铃薯番茄)植物细胞的融合杂种细胞AB融合的原生质体AB再生出细胞壁人工诱导动物细胞可以融合吗?如果可以,两者相同吗?2.2 动物细胞工程2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体带者问题走进课堂?两个细胞正在融合 受精作用动物细胞融合自主阅读,p52第2自然段,思考下列问题:1、什么叫E://生物教学/中学生物教学(高中)/选修3《现代生物科技专题》/专题二%20细胞工程/《动物细胞融合》.swf动物细胞融合 cell fusion?(概念要点)① 两个或多个动物细胞② 一个细胞(杂交单核细胞)E://生物教学/中学生物教学(高中)/选修3《现代生物科技专题》/专题二%20细胞工程/《动物细胞融合》.swf2E://生物教学/中学生物教学(高中)/选修3《现代生物科技专题》/专题二%20细胞工程/《动物细胞融合》.swf、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同?两者的融合过程是否也一样?提醒:有什么异同点呢? 诱导细胞融合物质:诱导剂:仙台病毒、聚乙二醇PEG诱导细胞融合的仙台病毒必须灭活。思考讨论:为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活?不灭活行吗? 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合,不灭活的话会感染细胞,而不能诱导细胞融合。比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞融合的方法诱导方法用途细胞膜的流动性细胞的全能性细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合物理(离心、振荡、电刺激)化学(聚乙二醇)物理、化学方法(同左)灭活的病毒获得杂种植株 3、动物细胞融合技术的发展简史告诉我们:科学技术是不断发展的。那么,实现动物细胞融合有什么意义呢?打破生殖隔离,使远缘杂交成为可能;广泛应用多个学科领域;重要用途:制备单克隆抗体。单克隆抗体McAb1、抗体1.1 概念: 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白 Ig。1.2 来源: B淋巴细胞。 B淋巴细胞与抗体的关系: 1.B淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生抗体。 2.动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体,每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 3.每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。自主阅读P52:传统的抗体的生产方法及缺陷是什么?怎样解决这个问题?2、单克隆抗体McAb(概念) 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点:特异性强、灵敏度高、 纯 度 高、产 量 大。 融合方式?如何大量生产单克隆抗体?利用淋巴细胞产生抗体的功能利用肿瘤细胞无限增殖的特性利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞如何筛选?生产单克隆抗体需要那些物质和技术呢? 注射抗原筛选,继续培养体外培养杂交瘤细胞细胞培养注射到小鼠腹腔骨髓瘤细胞B淋巴细胞细胞融合筛选足够数量的、能产生特定抗体的细胞群创始人:米尔斯坦单克隆抗体 3、单克隆抗体McAb制备过程专一抗体检验阳性?思考问题:1、本过程利用了哪些原理?免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合?这样融合成的杂交瘤细胞,继承了双亲细胞的遗传物质,不仅具有B细胞分泌抗体的能力,而且还有无限增殖的本领,因而可以获得大量单克隆抗体4、单克隆抗体的应用与常规抗体相比,单克隆抗体产量高,特异性强,灵敏度高,优越性十分明显。应用主要有:1、临床诊断、治疗疾病。2、作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”治疗肿瘤。两个过程三个“一”课堂小结你记住了吗?动物细胞融合过程单克隆抗体制备过程一个诱导细胞融合的新方法--灭活病毒一个新细胞--杂交瘤细胞一个优势--单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势课堂练习B1、动物细胞融合的目的中最重要的是 ( ) A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞2、 动物细胞融合过程中所用的诱导剂——灭活的病毒,抗原性和感染力的有无是 ( ) A.失去抗原性,具有感染力 B.具有抗原性,也具有感染力 C.失去抗原性,也失去
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