糖类物质测定2.pptVIP

(二).适用范围及特点 因为淀粉酶有严格的选择性、它只水解淀粉而不会水解其他多糖,如纤维素、半纤维素、多缩戊糖、果胶质等多糖，所以该法不受这些多糖的干扰，水解后可直接通过过滤除去这类多糖。 适合于这类多糖含量高的样品，分析结果准确可靠，重现性好。但操作复杂费时。 本法为GB/T5009.9-1985 中的第一法。 第32页/共44页 3. 操作方法 样品用乙醚除脂肪→ 用80%的乙醇除可溶性糖→ 然后，淀粉水解→麦芽糖+低分子糊精→过滤→滤液→酸化→葡萄糖→测定还原糖含量 测定还原糖含量 *0.9=淀粉含量 含淀粉 糊精、麦芽糖 葡萄糖 样品 酸解 液化 糖化 酸解 淀粉酶水解 有选择性 第33页/共44页 4.说明与讨论 ①脂肪的存在会妨碍酶对淀粉的作用及可溶性糖类的去除，故应用乙醚脱脂。若样品中脂肪含量较少，可省略此步骤。 ② 淀粉粒具有晶格结构，淀粉酶难以作用。加热糊化破坏了淀粉的晶格结构，使其易于被淀粉酶作用。 酶水解开始要使淀粉糊化， 将烧杯置沸水浴上加热15分钟，使放冷至60 ℃以下，然后再加入20m1淀粉酶溶液，在55 ~ 60℃保温1小时，并不时搅拌。 取1滴此液于白色点滴板上，加1滴碘液应不呈蓝色，若呈蓝色，再加热糊化，冷却至60c以下，再加20