辣根过氧化物酶的化学修饰及其运用.pdfVIP

中文摘要 辣根过氧化物酶(HRP)是一种来源最为广泛而价格较为低廉的过氧化物酶， 在过氧化氢或烷基过氧化物存在时能催化有机物的氧传递反应。辣根过氧化物酶 在有机合成、聚合物合成和含酚废水的治理上具有广泛的应用，但目前真正商业 化的工业过程仍未研发成功。其主要原因就是天然酶在有机溶剂中催化效率低几 个数量级低，而且其稳定性也低。为了改善辣根过氧化物酶的催化性能，作者在 查阅并分析了大量文献的基础上，确立了硕士论文的研究内容。选择了两种化学 小分子修饰剂对辣根过氧化物酶进行修饰，深入研究了修饰酶在稳定性、催化性 能及耐有机溶剂能力等方面的变化，取得了较为满意的结果。论文的主要内容如 下： 1．选取了两种化学小分子修饰剂(柠康酐和马来酸酐)对辣根过氧化物酶 表面的赖氨酸进行修饰后，发现修饰后的酶不仅没失活，反而在热稳定性、酸碱 稳定性方面得到了改善。其中，与天然酶相比，热稳定性提高了大约4．7倍，酸 碱稳定性的范围拓宽，而且柠康酐修饰酶和马来酸酐修饰酶的修饰度分别为56．1 ％和46．7％。从它们在水相中的动力学常数可以判断，与天然酶相比，修饰酶与 底物的亲和力大，而且对于酚的去除反应的催化效率高。这就证明了只要选择合 适的修饰剂和修饰方法，就能够利用化学方法快速、廉价地提高酶的稳定性。 2．在有机溶剂中催化研究，发现修饰酶与天然酶相比，耐有机溶剂(与水 互溶)的能力得到了改善，即在有机溶剂中的催化性能得到了改善。尤其当甲醇 的含量低于40％时，酶的相对酶活不但不随甲醇含量的增加而降低，反而增加。 通过酶在有机溶剂中酶比活和动力学常数的测定，验证了修饰酶耐有机溶剂能力 确实是得到了提高。在同一种有机溶剂中，对酶比活、亲和力、催化性能来说： 柠康酐修饰酶马来酸酐修饰酶天然酶。 3．将修饰酶和天然酶用于染料的脱色，通过测定脱色的最佳条件，我们发 现相同条件下，修饰酶的脱色效率高于天然酶，尤其是柠康酐修饰酶。并且对溴 酚兰来说，几乎可以完全脱色，而对甲基橙来说，脱色率大约在70％～80％。 同时我们测定了不同pH值下两种染料脱色的动力学常数，发现动力学常数进一 步验证了前面最佳脱色pH的范围，并且与天然酶相比，修饰酶对染料底物的亲 和力要大，且对染料脱色的催化效率也要高。 关键词：化学修饰，辣根过氧化物酶，有机相，染料脱色，动力学 II Abstract of TheChemicalModificationHorseradishPeroxidase Their and Applications Major：Bio—InorganicChemistry Name：Wang Tengli Ji Supervisor：ProfessorLiangnian AssociateProfessorLiu Jianzhong Horseradish theoxidation of aromatic peroxidase(HI冲)catalyzes aqueous inthe of was in compoundspresenthydrogenperoxide．It successfullyapplied