glucgfp双标记系统及h5n1假病毒的构建与验证-construction and verification of glucgfp double labeling system and h5n1 pseudovirus.docx

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glucgfp双标记系统及h5n1假病毒的构建与验证-construction and verification of glucgfp double labeling system and h5n1 pseudovirus

目录缩略词表…………………………………………………………………1 摘要………………………………………………………………………3Abstract ………………………………………………………………….5 前言………………………………………………………………………7 1 流感病毒简介…………………………………………………………72 光学分子影像学简介…………………………………………………73 光学分子影像学流感病毒的致病性研究……………………………94 假病毒的应用研究进展……………………………………………...95 本课题的研究内容与研究意义 …………………………………..10 第一部分 Gluc-GFP 双标记系统的构建…………...…………………11 引言……………………………………..………………………..……11 一、材料与方法……………………………………………………… 121 主要实验材料…………………………………….……….……… 122 主要溶液配制 …………………………………………………… 133 主要实验仪器与设备………………………………………………144 试验方法……………………………………………………………15 二、实验结果…………………………………………………………28 三、讨论………………………………………………………………35 第二部分 H5N1 禽流感病毒假病毒系统的构建及验证 ……………36 引言 ……………………………………………………………….…36 一、材料与方法……………………………………………………...371 主要实验材料 ………………………………………….…………372 主要试剂的配制 ……………………………………….…………383 主要设备与仪器 …………………………………………..………394 实验方法 ………………………………………………….………40二、实验结果 ………………………………………………….…… 43 三、讨论……………………………………………………….……...48 总结…………………………………………………………….……… 50 参考文献 ………………………………………………………………51 附录……………………………………………………………………..55 致谢……………………………………………………………………..56 综述 ……………………………………………………………………57缩略词表英文缩写英文全称中文全称AIVAvian influenza virus禽流感病毒AmpAmpicillin氨苄青霉素BSABovine serum albumin牛血清白蛋白CPECytopathiceffect致细胞病变作用DaDalton道尔顿DNADeoxy-ribonucleic acid脱氧核糖核酸DMEMDulbecco’s modified eagle mediumDMEM 细胞培养基DMSODimethysulfoxid二甲基亚砜E.coliEscherichia coli大肠杆菌ELISAEnzyme-linked immunosorbent assay酶联免疫吸附试验FITCFluorescein isothiocyanate异硫氰酸荧光素FlucFirefly luciferase萤火虫荧光素酶GFPGreen fluorescent protein绿色荧光蛋白GlucGaussia luciferaseGaussia 荧光素酶HAHaemaglutinin血凝素HIVHuman immunodeficienty virus人类免疫缺陷病毒HRPHorseradish peroxidase辣根过氧化酶IFAIndirect fluorescent antibody test间接免疫荧光试验LIPSLuciferase immunoprecipitation system荧光素酶免疫共沉淀系统MDCKMadin darby canine kidney马丁达犬肾细胞NANeuraminidase神经氨酸酶NTPNucleoside triphosphate三磷酸腺苷ODOptical density吸光度ORFOpen reading frame开放读码框PBSPhosphate buffered saline磷酸盐缓冲液1PCR PEG RFPRluc rpm RTPolymerase chain reaction Polyethylene glycolRed fluorescent protein Renilla luciferase Revolution per minute Reverse transcription聚合酶链式反应 聚乙二醇 红色荧

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