原发性开角型青光眼和眼皮肤白化病1型致病基因的研究-study on pathogenic genes of primary open-angle glaucoma and ocular skin albinism type 1.docxVIP

第一部分 原发性开角型青光眼论文摘要青光眼是一种具有特征性的视盘表现和特殊的视野缺损模式的视神经病变，常常伴随 或不伴有眼内压的升高。青光眼是世界上第二大致盲眼病，全世界约有 6,680 万人患病，其中 670 万人为双眼盲。原发性开角型青光眼（POAG）是该病最常见的类型，它是一种 多因素致病性疾病。遗传因素在其发病过程中起着重要而复杂的作用。等位基因异质性、 遗传位点多样性、表型多样性以及基因-基因或基因-环境因素的交互作用都使得 POAG 的 遗传性分析变得更加复杂。迄今已发现 22 个染色体遗传位点与 POAG 有关。但从这些遗 传位点中仅鉴定出 3 个 POAG 致病基因：小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白基因（MYOC）， 视神经病变诱导反应蛋白基因（OPTN）和色氨酸-天冬氨酸重复序列 36 基因（WDR36）。 而这 3 个基因的突变仅可解释不超过 10%的 POAG 病例。因此，预期尚有其他的遗传位点 可影响 POAG 的发病。为寻找新的 POAG 致病基因，我们收集了 1 个遗传三代的呈常染色体显性遗传方式的 中国青少年型 POAG（JOAG）家系，本研究小组之前的研究结果显示，该家系中并未存 在 MYOC、OPTN 和 WDR36 基因突变。结合以基因为基础的单核苷酸多态性病例-对照相 关性分析结果，我们选取了 4 个候选基因：DPP8，MYCPP，RB11A 和 MEGF11。先用聚 合酶链式反应扩增该家系中候选基因所有外显子序列和邻近部分内含子序列，然后直接用 荧光标记自动 DNA 测序法检测在该家系中各基因的多态性。最后用病例-对照相关性分析 法对可疑基因进行全基因扫描，以验证所选基因是否为致病性基因。在该研究中，我们共在候选基因中检测到 22 个序列改变，其中 7 个 SNPs 在该家系中 表现为不完全共分离。然而，进一步的相关性研究分析显示所发现的 7 个 SNPs 在病例组 和对照组间出现频率的差异均无显著统计学意义。但通过进一步的分析发现，MEGF11 基 因中所发现的 865DEL-T 突变在病例-对照相关性研究中仅在病例组中出现，而且预测此突 变极有可能改变所编码蛋白在生物体内的功能，所以其可能是罕见的 POAG 致病突变。我 们对 MEGF11 基因进行全基因扫描，共发现 43 个 SNPs，且他们在病例组和对照组间出现频率的差异同样无显著的统计学意义，但其中 6 个 SNPs 为本研究新发现的序列改变，仅见于病例组。通过本次研究，我们发现一可疑的 POAG 致病基因—MEGF11 基因在所研究家系中不 完全共分离。同时，我们在该研究中也检测到一些罕见的序列改变，仅出现在病例组中， 如 136GA（E46K），1160AG （D387G），1198GA（D400/N），2247AC（Q749H），2413GA（G805S）和 2639GT（C880F）。上述 MEGF11 基因的序列改变可能增加了 POAG 发病的危险性。我们的研究结果提示，MEGF11 基因突变可能非常少见，仅占 POAG 病人 的一少部分，或者可能另外一个基因才是该家系青光眼的致病基因，但在本研究中尚未发 现。【关键词】原发性开角型青光眼；MEGF11；基因；突变ABSTRACTGlaucoma is an optic neuropathy with characteristic appearances of the optic disc and specific pattern of visual defects that usually associated with or without raised intraocular pressure. It is the second leading cause of blindness in the world. It has been estimated that the disease affects 66.8 million people, and 6.7 million of these have bilaterally blindness. Primary open-angle glaucoma (POAG) is the commonest form of this disease. It is a multi-factorial disease. The genetics play an important but complex role in it. Allelic heterogeneity, locus heterogeneity, phenotypic variability, gene-gene or gene-environment in