RAFT法分解含糖聚合物-多肽蛋白质生物缀合物.pdf

摘要 摘 要 将生物分子多肽／蛋白质缀合到聚合物上可以改善生物分子的稳定性并提 高其溶解性，形成新型的生物功能材料，这种聚合物～多肽／蛋白质生物缀合物 在医药，生物技术以及纳米技术等领域有着重要的应用价值。含糖聚合物具有 特异性识别以及生物相容性，因此将多肽／蛋白质与含糖聚合物缀合，可以形成 具有特异识别性的生物缀合物，在生物医药及药物传输体系开辟了新的应用价 值。将活性／可控自由基聚合与偶联反应相结合是一种合成生物缀合物的有效途 径。本文中，我们将可逆加成．裂解链转移(RAFT)自由基聚合方法与偶联反应如 巯基．二硫交换反应和点击反应相结合，分别合成了含糖聚合物．多肽生物缀合 物，温敏性含糖聚合物．蛋白质生物缀合物，遥爪聚合物，并且对生物缀合物的 溶液性能进行了详细的研究。 1．RAFT聚合结合巯基．二硫交换反应合成具有抗氧化性的含糖聚合物．多肽 生物缀合物。 1)RAFT法聚合保护性的糖单体甲基丙烯酸2．(2’，3’，4’，6’．四．O一乙酰基一D—D- 吡喃葡萄糖氧)乙酯(AcGEMA)合成含糖聚合物PAcGlcEMA。一步法得到端基含 有二硫吡啶(PDS)基团的功能性聚合物PAcGlcEMA．PDS。脱去保护基团后， 得到水溶性的含糖聚合物聚甲基丙烯酸(2．(13…D毗喃葡萄糖氧)乙酯 (PGleEMA)。 2)通过巯基．二硫交换反应将还原性谷胱甘肽(GSH)缀合到聚合物PGlcEMA 末端，得到聚合物．多肽生物缀合物PGlcEMA．GSH。利用紫外，荧光和电镜研 究了此缀合物的特异识别性。采用DPPH(1，1．二苯基…2三硝基苯肼)法研究了 力与时间和温度有关，在37。C下可以持续的清除自由基，24h之后对DPPH的 清除率约为50％。 2．RAFT聚合结合巯基一二硫交换反应制备温敏性含糖聚合物-蛋白质生物 缀合物。 1)RAFT法聚合单体2．(2．甲氧基乙氧基)甲基丙烯酸酯乙酯ME02MA和 摘要 Critical 过控制两种单体的比例调节共聚物的最低临界溶液温度LCST(Lower Solution Temperature)。 2)利用三组分体系(茜素红AR，苯硼酸PBA及聚合物)研究了温度对糖 基结合能力的调控，发现温度高于LCST之上时，糖基取代AR与PBA结合的 能力比较弱，当温度再降到LCST之下时，含糖聚合物和PBA的结合能力随之 增加，因此可将温度做为糖基识别的开关。 3)一步法得到端基含有二硫吡啶(PDS)基团的功能性聚合物 到共聚物的末端，得到温敏性生物缀合物PME02MA．CO．PMGlc—BSA。圆二色谱 表征以及对硝基苯乙酸乙酯水解实验结果说明与聚合物缀合后的BSA结构和活 性保持完好。 3．RAFT聚合结合偶联反应一步法制备遥爪缀合物。 点击反应和巯基．二硫交换反应一步法合成了遥爪聚合物 了生物素(biotin)与亲和素(avidin)的相互作用，发现此缀合物对亲和素具有 特异性相互作用。 关键词：可逆加成一断裂链转移自由基聚合，偶联反应含糖聚合物生物缀合物 温度响应性 Abstract Abstract The of to canmediatetheir bioconjugationpepfide／proteinpolymers stability， functionalbiomaterials．The have and new bioconjugates solubility，andgenerate fieldsof inthe nanotechnology． manyapplications pharmaceutics，biotechnology，a