pH和磁场双重呼应性聚氨基酸类药物载体的合成及控制释放研究.pdf

摘要 摘要 抗癌药物在人体内的非特异性分布导致严重的毒副作用，使其临床应用受 到很大限制。利用正常组织和肿瘤细胞内外pH环境的差异，人们设计了具有pH 响应性的纳米药物载体，大大提高了抗癌药物药物的生物利用度，在提高癌细 胞杀灭效率的同时减轻了对正常组织细胞的伤害。在药物释放载体材料中，聚 氨基酸材料具有良好的生物相容性和生物可降解性，同时具有丰富的侧基，通 过侧基改性可以调节其侧链基团，赋予其pH响应性。此外，利用pH响应性共 价键制备壳层可离去的药物载体，既可以在正常生理条件下有效的延长纳米载 体在体内的循环时间；也可以在肿瘤弱酸性环境下，使其亲水性壳层离去，促 进载体与细胞膜的相互作用，加速药物的释放。研究表明，具有良好顺磁性的 纳米药物载体，在体外磁场的引导下可以控制药物载体富集于特定组织或病灶 区域。磁性纳米载体具有导向方法简单，控制导向容易的特点。 本论文合成了一系列具有pH．响应性的聚乙二醇一聚天冬酰胺衍生物．聚丙氨 酸三嵌段聚合物。首先通过大分子引发剂PEG．NH2引发氨基酸环内酸酐逐步开 环聚合的方法合成聚乙二醇．聚天冬(谷)氨酸苄酯．聚丙氨酸(mPEG．PBLA．PAla) 三嵌段共聚物，再对其进行侧基改性，使聚天冬氨酸苄酯转变为含有吗啉、咪 唑、酰肼或羧基的聚谷氨酸或聚天冬酰胺衍生物，从而赋予其不同的pH．响应性 能。此类聚合物在选择性溶剂中可以白组装形成核．壳．冠型三层胶束结构，其中 聚天冬(谷)酰胺衍生物链段形成pH响应性的壳层，实现载药粒子在肿瘤细胞 周围低pH值环境下的靶向释放药物的功能；聚丙氨酸链段提供疏水性的内核， 使载药粒子在体内循环过程中具有稳定的胶束结构；外层的聚乙二醇链段形成 水合层，可以有效保护内部负载的药物分子同时延长药物的体内循环时间。使 用核磁共振，毛．电势，动态光散射，透射电镜等手段系统表征了这类胺解和水 解改性三嵌段共聚物的结构、白组装过程及胶束的pH．响应性。以阿霉素作为模 型药物，研究了四种三嵌段共聚物的药物负载机理及不同pH条件下药物的释放 情况和释放机理。实验结果表明上述四种聚合物均具有pH响应性药物释放的特 点，在弱酸性条件下药物释放速度和释放量明显高于中性条件。其中用3．胺丙 基吗啉和3．胺丙基咪唑改性的聚合物，侧基为弱碱性基团，pKa=6．7。通过氢键 摘要 或饨．兀相互作用可以将阿霉素负载到胶束粒子中。在正常的生理条件下，整个聚 氨基酸链段呈疏水性，药物分子与链段侧基存在较强的相互作用，且链段排列 紧密，药物的扩散受到限制。随着环境pH值的降低，聚合物的吗啉(咪唑)基、 阿霉素(DOX)的胺基去质子化，均带正电荷，产生静电排斥。同时，聚天冬 酰胺链段由疏水变为亲水，链段更为舒展，逐步打开，导致包埋药物的释放量 和释放速率增加。利用水合肼胺解，将酰肼基引入到聚氨基酸侧链，利用酰肼 基与阿霉素的13．C羰基反应生成具有pH响应性的腙键，将DOX键合到聚氨基 酸侧链，通过键合DOX和游离DOX的兀．兀叠合作用，提高体系的载药能力。此 载药胶束在酸性条件下，由于腙键发生断裂、键合药物脱落，胶束的聚氨基酸 链段亲水性增加，胶束局部解离使得所包裹药物加速释放。对于聚乙二醇．聚谷 氨酸．聚丙氨酸载药胶束，由于酸性条件下谷氨酸部分仪．螺旋含量增加，对链段 周围负载DOX分子造成挤压，提高了药物的释放能力。 论文选用化学沉淀法合成了磁性纳米粒子，使用柠檬酸钠处理增加其分散 性，接着在磁性纳米粒子表面包裹二氧化硅，增强了其反应活性，并对其进行 化学修饰，使其表面带羧基。通过缩合反应将聚乙二醇．聚天冬氨酸苄酯化学键 合到磁性粒子表面，合成磁性高分子微球。通过侧基咪唑改性，合成同时具有 pH响应性和磁响应性的复合聚合物微球。研究表明，此载药粒子同时具有pH 响应性药物释放能力和外磁场导向靶向响应性。 设计具有pH响应性的可离去壳层的药物载体，即以高温分解法合成磁性四 氧化三铁为核、咪唑改性的聚天冬酰胺为壳、具有pH响应性的可离去的聚乙二 醇苯甲醛为冠，形成的核．壳．冠三层结构的药物载体。在正常生理条件下胶束稳 定存在而不带电荷，在外加磁场下，药物载体可以定向到达病变组织，pH响应 性共价键断裂，亲水性的冠层离去，使得载体表面带正电荷，与带有负电荷的 细胞膜形成较强的相互作用，促进细胞的摄取。药物载体在内涵体中完全解缔 合，并具有很强的破坏内涵体膜的作用。含有咪唑侧基的聚天冬酰胺在病变部 位质子化，亲水性增加，使得包裹的药