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GATA-4、NKx2-5转录因子研究进展 　　文章编号：1009-5519（2008）15-2287-02 中图分类号：R363 文献标识码：A 　　 　　转录因子GATA家族是能与核酸共同序列(A/T)GATA(A/G) 结合的细胞核转录因子，包括6个成员，即GATA-1、-2、-3、-4、 -5和-6。1995年Huang等[1]通过筛查人类心脏cDNA文库首次克隆出人类GATA-4 cDNA，以后相继在人类肺、肝脏和小肠等器官中检测到GATA-4 mRNA和蛋白的表达。人们应用果蝇同源结构域( homeodomain，HD) 寡核苷酸探针筛查果蝇cDNA文库，克隆出NK型同源盒基因， 随后分离出一种与果蝇背侧血管/ 心脏发育密切相关的果蝇NK－2型基因tinman基因。GATA－4和NKx2-5是目前研究较多的与心脏发育密切相关的转录因子。 　　 　　1 GATA-4转录因子 　　 　　GATA是一组组织特异性表达的转录因子，具有结合核酸共同序列(A/T)GATA(A/G)的特性，其中某些成员参与心脏的发育过程。脊椎动物有6个GATA转录因子，每个包含一个高度保守的DNA结合区域，这个区域由2锌指结构(Cys－X2－Cys－X17－Cys－X2－Cys)组成，其C末端主要结合DNA。许多离体实验中显示只有羧基末端锌指结构和其毗连领域是DNA特殊的结合位点。而氨基末端锌指与GATA伴侣蛋白( friend of GATA， FOG)转录因子相互作用锌指不仅可以结合于DNA，还能与RNA， DNA-RNA杂交体和其他锌指蛋白结合，控制生物体中蛋白的转录和翻译过程。虽GATA家族各个因子均认可一种GATA DNA 结合序列， 但因结合序列核心DNA的轻微不同，导致GATA 家族不同成员作用于不同的组织。人类GATA-4基因位于染色体8p23.1～p22，包括7个外显子，编码442个氨基酸，分子质量为44 627 u。GATA-4 mRNA在胚胎期和新生小鼠的心脏、原肠、生殖腺、肝脏和原始内胚层中均可以检测到，且在成年小鼠的心脏、性腺、肺、肝脏和小肠中亦有表达[2]。虽然GATA-4 因子表达广泛，其对于心脏发育却是必需的，是心脏前体细胞的最早期标志之一，是心脏发育过程中的重要转录因子，它首先在心前期中胚层表达，随后在心内膜及心肌中表达，几种心脏基因的控制区均存在GATA－4 结合位点。 　　1.1 GATA-4与心脏发育：目前对GATA-4的研究主要集中在心脏方面，调节心脏前体细胞的分化、心脏的环化、房室的分隔、传导系统的维持[3]。GATA-4 在小鼠胚胎以及心脏发育的整个过程中表达，最早在小鼠胚胎发育第7～7.5 天出现，表达于体腔上皮细胞;在线性心管形成和卷曲时( 约胚胎发育第8 天) ， GATA-4 表达于心内膜、心肌层中隔和胚内体腔上皮细胞到心脏分隔开始(约胚胎发育第9天)，GATA-4呈高度表达，遍及心内膜、心内膜垫组织和心肌层。GATA-4在心肌层中的表达一直持续至出生后，GATA-4基因的这种时空表达模式说明其在心脏分化中有重要作用[4]。研究发现，GATA-4蛋白表达量减少70%，鼠胚胎死于孕龄13.5～16.5天，表现为完全性房室通道缺损、右室双流出道、心肌增殖减少所致的心室肌发育不全， 并且伴有严重的舒张功能障碍和房室反流，而收缩功能和冠脉系统均正常，这说明GATA-4表达水平的改变会影响胚胎心脏形态发育和功能[5]。GATA－4在胚胎嘴侧到尾侧和侧面到腹侧的折叠过程中起到关键性作用，这是心脏形成所必须的[6]。GATA－4突变引起人类先天性心脏病[7]。 　　1.2 GATA-4与卵泡发育：Gillio-Meina 等[8]研究GATA-4 在小鼠、猪以及人类的卵巢中表达情况，结果显示GATA-4 参与卵泡发育的整个过程，始基卵泡中GATA-4 mRNA和蛋白定位于颗粒细胞，初级卵泡和窦状卵泡中的GATA-4 主要是在增生活跃的颗粒细胞中表达， 其表达水平随颗粒细胞的增殖活性同步增加。其中绝大多数初级卵泡无法发育成窦状卵泡而发生凋亡，卵泡凋亡的增加与 GATA-4表达的降低相关。在窦状卵泡的选择和优势化过程中，GATA-4大量表达，其表达量随着卵泡发育而不断增高，发挥正向调节作用。一旦卵泡发育成排卵前状态时，GATA-4 mRNA表达将达到最高值;而在非优势卵泡中，卵泡通过程序性死亡发生卵泡闭锁之前，GATA-4在所有颗粒细胞中的表达都急剧下降，认为GATA-4 表达降低与卵泡闭锁相关。排卵后，GATA-4在颗粒黄体细胞中表达逐渐降低， GATA-4在黄体中表达比卵泡低，在退化黄体中表达比妊娠黄体低。可以看出GATA-4的表达量随着卵泡发育过程呈现出动态变化，故推测GATA-4的