VEGF-siRNA在肾癌中实验研究.docVIP

VEGF-siRNA在肾癌中实验研究 　　[摘要] 目的 研究血管内皮生长因VEGF在肾癌细胞中的表达，检测对肾肿瘤的影响。 方法 将针对血管内皮生长因子的RNA的模板区的siRNA转导肾癌细胞786-0中，采用免疫组化检测血管内皮因子VEGF的蛋白的表达，通过siRNA对血管内皮生长因子的抑制，减少肿瘤中血管的生成，从而抑制小鼠肿瘤的生长。 结果 通过siRNA对肾癌血管内的血管内皮生长因子的干扰，抑制了肿瘤血管的生长，减慢了肿瘤的生长速度。 结论 siRNA抑制血管内皮生长因子的表达，能明显减慢肿瘤的生长速度；肿瘤的生长速度与VEGF过度表达有关。 　　[关键词] 血管内皮生长因子；肾肿瘤；小鼠肿瘤体积 　　[中图分类号] R737.11[文献标识码] A[文章编号] 1673-7210（2012）03（c）-0022-03 　　Experimental research of VEGF-siRNA in renal carcinoma 　　SUI Yudong WANG Xiaomin▲ YANG Dejun WANG Keliang 　　Department of Urinary Surgery, the Fourth Affiliated Hospital of Harbin Medical University, Heilongjiang Province, Harbin 150001, China 　　[Abstract] Objective To investigate the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) in renal carcinoma cell, detect the influence to renal carcinoma. Methods siRNA contraposed RNA of VEGF in template area was transducted in 786-0 of renal carcinoma cell, detected albumen expression of VEGF adopt immunohistochemistry, reduced angiogenesis in tumour through inhibiting VEGF by siRNA, inhibited tumor growth of mouse. Results Through obstructing VEGF in artery of renal carcinoma by siRNA, tumor vessel growth had been inhibited, the velocity of tumor vessel growth had been revved down. Conclusion siRNA can inhibit the expression of VEGF, down the velocity of tumor vessel growth which has relation with overexpression of VEGF. 　　[Key words] Vascular endothelial growth factor; Renal tumor; Gross tumor volume of mouse 　　肾癌是泌尿系统中最常见的肿瘤，在治疗上通常采用的是手术治疗，但是在早期诊断时有大约30%的患者存在转移的现象，其转移的主要方式是血道转移和淋巴道转移[1]。肿瘤的转移是涉及很多因子的复杂过程，研究发现有很多因子参与转移过程，最值得关注的是血管内皮生长因子VEGF，其是通过旁分泌的方式释放，从而刺激肿瘤血管的生成，加快肿瘤的生长，VEGF不仅加快血管生长速度，也增加血管的通透??，Ferrara 等[2]报道中提及肾癌的肿瘤的生长是通过自分泌和有通透性的作用。为了减少肾癌的远处转移和抑制肿瘤的生长速度，采用了对siRNA和血管内皮生长因子的研究，探讨肾癌的治疗前景。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验体外过程 　　1.1.1 实验材料肾癌细胞786-0由实验室自身提供，siRNA的设计：在Gene Bank查找编码人VEGF cDNA的序列，应用Ambion公司RNAi设计软件并参考有关文献，进行全基因组扫描和序列同源分析，设计针对VEGF mRNA不同剪接子的RNAi作用的公共靶点，上述由广东锐博合成所需的编码RNA，然后由该公司转导质粒中。 　　1.1.2 方法siRNA的合成：广东锐博根据提供参考的碱基对5′-ＧＡＴＣＣＡＣＣＴＣＡＣＣＡＡＧＧＣ