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一株腈水合酶产生菌的筛选_鉴定及培养条件研究.doc
一株腈水合酶产生菌的筛选_鉴定及培养条件研究
导读:就爱阅读网友为您分享以下“一株腈水合酶产生菌的筛选_鉴定及培养条件研究”资讯,希望对您有所帮助,感谢您对92的支持!
第 23 卷 第 4 期 2008 年 12 月Vol.23 No. 4 Dec. 2008一株腈水合酶产生菌的筛选、鉴定及培养条件研究钟莉萍,张锦丽,宋 洋,张朝正(天津市工业微生物重点实验室, 天津科技大学生物工程学院, 天津 300457)摘要:以葡萄糖为碳源, 逐步增大培养基中丙烯腈浓度进行重复续代培养, 从土样中筛选到一株腈水合酶活力较高的菌株. 经形态观察和 16S,rDNA 序列分析, 该菌株鉴定为红球菌属( Rhodococcus )菌株, 命名为 Rhodococcus sp.TCCC 28001. 对菌株 TCCC 28001 培养条件进行了初步研究, 确定培养基为葡萄糖 15,g/L, 酵母粉 5,g/L, 尿素 7,g/L, Co2+ 10×10-5,mol/L. 28,, 180,r/min 培养 72,h, 腈水合酶活力达 892,U/mL. 关键词:丙烯腈;腈水合酶;红球菌;菌种鉴定 中图分类号:TQ920.1 文献标识码:A 文章编号:1672-6510(2008)04-0035-05Study on Screening, Identification and Culture Conditions of a Strain with Nitrile HydrataseZHONG Li-ping,ZHANG Jin-li,SONG Yang,ZHANG Chao-zheng(Tianjin Key Laboratory of Industrial Microbiology, College of Biotechnology, Tianjin University of Science Technology, Tianjin 300457, China) Abstract:A strain with nitrile hydratase activity, was isolated and screened from soil, by repeated subcultured in the medium culture containing increasing acrylonitrile and glucose as the carbon source. According to morphology and 16S rDNA sequence analysis, the strain is belonged to genus Rhodococcus,named as Rhodococcus sp. TCCC 28001. After optimizing the culture conditions, the optimum conditions are as follows: glucose 15,g/L, yeast extract 5,g/L, urea 7,g/L, Co2+ 10× 10-5,mol/L. As the strain was cultured with the optimized culture medium and a rotation rate of 180 r/min for 72,h at 28,, the nitrile hydratase activity could reach 892,U/mL. Keywords:acrylonitrile;nitrile hydratase;Rhodococcus;strain identification腈(R—CN)是一类重要化合物, 其水解反应广 泛应用于氨基酸、 酰胺( R — CONH2 )、 羧酸( R — [1] COOH)及其衍生物的合成 . 自然界中一些微生物 能利用腈作为生长所必需的碳源和氮源, 将腈转化为 其他有机物. 与化学水解法相比, 微生物催化法具有 条件温和, 环境污染小, 腈转化率高等优点, 并能实 [2,3] 现化学选择、 区域选择和对映选择 . 因此从自然界 中筛选具有腈转化能力的微生物菌种尤为重要. 腈水合酶产生菌的种类多、 分布广, 目前已应用收稿日期:2008-01-09;修回日期:2008-03-11 基金项目:国家科技基础条件平台项目(2005DKA21204-10) 作者简介:钟莉萍(1984—),女,江西人,硕士研究生.于丙烯酰胺工业生产的微生物有红球菌(Rhodococcus )、 诺卡氏菌( Nocardia )、 假诺卡氏菌( Pseudonoc
arida)、 棒状杆菌( Coryneb
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