鸭圆环病毒的鉴别检测聚合酶链式反应法征求意见稿编制说明.docVIP

广西地方标准《鸭圆环病毒的检测 聚合酶链式反应法》 （征求意见稿）编制说明 一、项目背景、来源及目的 1、项目背景 鸭圆环病毒（Duck circovirus，DuCV）是圆环病毒科圆环病毒属的新成员，该病毒无囊膜，二十面体对称，基因组为单股环型DNA。近年来研究表明DuCV侵害宿主的免疫系统，导致宿主免疫力低下甚至免疫失败，进而引发二重或多重感染，给养殖业造成极大经济损失。 自2003年德国学者Hatterman等首次报道以来，DuCV 已经在德国、美国、匈牙利、韩国和我国台湾等多个国家和地区被发现。近年来在中国大陆各养鸭业较为发达的省市也报道了该病毒的流行。DuCV由于损害机体淋巴组织，造成免疫低下，进而增大了感染其他疾病的几率。DuCV经常以亚临床感染的形式出现，常被人们所忽视，因此更应给予特别的关注 。 由于目前尚无法对鸭圆环病毒进行体外增殖培养，不能进行传统的病毒分离鉴定。目前对鸭圆环病毒的病原学检测方法主要为PCR、荧光PCR、核酸探针法、Lamp环介导等温扩增法和免疫荧光法，抗体检测方法主要是ELISA法。其中普通 PCR 具有特异性好、灵敏度高、价格低廉、简便快速等优点，因此使用广泛。 目前，我国尚无应用鸭圆环病毒的PCR检测相关地方标准、行业标准或国家标准。2013年以来，本单位根据我区动物疫病监测、检测、诊断的需要，研制、开发了鸭圆环病毒的PCR检测方法，并应用于临床检测，效果显著。这些方法已经实验室及临床反复应用，证明具有特异性强、敏感性高、准确、快速、高效的特点，值得制定成广西地方标准，作为检测依据在全区推广应用。 2、项目来源 本标准为自治区质量技术监督局下达给广西动物疫病预防控制中心承担的2017年第六批广西地方标准制定（修订）计划任务项目（桂质监函[2017]242号）。 3、项目目的 目前对鸭圆环病毒的病原学检测方法主要为PCR、荧光PCR、核酸探针法、Lamp环介导等温扩增法和免疫荧光法，抗体检测方法主要是ELISA法。其中普通 PCR 具有特异性好、灵敏度高、价格低廉、简便快速等优点，因此使用广泛。因此本项目尝试编写检测DuCV的推荐性地方标准，内容涵盖应用聚合酶链反应法检测DuCV的材料准备、操作方法及结果判定等。 二、工作概况 从2012年以来，我单位承担了广西自然科学基金项目（2012GXNSFAA053073）《水禽新发疫病分子流行病学与快速检测技术研究》。课题组在DuCV的PCR检测上做了大量研究，并建立了DuCV的PCR检测方法。鉴于国内DuCV的PCR检测方法尚无地方标准、行业标准或国家标准的实际，课题组开展了相关资料的收集整理工作，确定标准编写目标和依据，同时起草制（修）订广西地方标准项目建议书，积极开展标准的申报。2017年7月接到自治区质量技术监督局下达的地方标准制定（修订）项目计划的通知后，迅速成立标准编制课题组，确定标准起草编写方案及时间进度表，并积极组织实施。本标准编制课题组人员包括：粟艳琼、郑敏、尹彦文、张步娴、莫胜兰、屈素洁、邹联斌、胡杰、施开创、李军。具体分工如下： 粟艳琼：全面负责标准起草、修改、送审、报批。 郑 敏：负责标准起草。 尹彦文：负责平行试验。 张步娴：负责比对试验。 莫胜兰：负责比对试验。 屈素洁：负责比对试验。 邹联斌：负责平行试验。 胡 杰：负责标准检验。 施开创：负责标准稿审核。 李 军：负责标准稿审核。 三、标准编制原则 1、政策性原则：本标准编写过程遵循国家相关法律、法规和国家标准。 2、先进性原则：以国内外相关文献资料为参考，力求反映最新的科技成果；以国内同类标准的编写方法为基础，对本标准进行规范、充实和创新，使之具有先进性。 3、经济性原则：本项目为自筹经费项目，因此在本标准编制过程，从获取信息、起草、实验室和临床验证到形成征求意见稿的每一个环节，在确保质量的前提下均厉行节约，利用有限的经费圆满完成各阶段编写任务。 4、适用性原则：本标准集国内外DuCV聚合酶链反应法检测技术的成功经验，并经实验室和临床验证，且完全按照国家标准的要求编写，内容全面，形式规范，可操作和实用性强。 5、协调统一性原则：本标准参照国内相关标准的编写形式和表达方法，力求与国内相关标准的协调统一。本标准通过持续查新，确保内容不与已有的国家标准、行业标准和地方标准重复或相矛盾。 6、规范化原则：本标准是严格按照GB/T 1.1-2009的要求来编写的。 四、标准主要内容及依据 本标准是动物疫病防控地方标准，标准编写的重点是疫病的检测。标准的主要依据是借鉴国内先进的标准和技术内容，参考国内外有关文献资料，结合我国国情，进行实践研究，并通过试验和验证后，并参考其他资料经室内、室间验证提出。 标准编写的主要内容包括样品的采集、样品的处理、PCR操作过程以及结果