《微生物与发酵工程》第3章 发酵机制及发酵动力学3、4节.ppt

第三章 发酵机制及发酵动力学 第三节 糖代谢产物的发酵机制 一、厌氧发酵代谢产物发酵机制 葡萄糖在微生物细胞中进行厌氧分解时，通过EMP、HMP、ED及PK途径形成多种中间代谢物。在不同的微生物细胞中及不同的环境条件下,这些中间代谢物进一步转化，形成各种不同的发酵产物。根据发酵产物的不同，发酵类型主要有乙醇发酵、甘油发酵、乳酸发酵、丙酮丁醇发酵、混合发酵等。 一、厌氧发酵代谢产物发酵机制 （一）乙醇和甘油发酵 酵母菌的乙醇发酵（Ⅰ型发酵） 酵母菌的甘油发酵（Ⅱ型发酵） 酵母菌的甘油发酵（Ⅲ型发酵） 细菌的乙醇发酵 一、厌氧发酵代谢产物发酵机制 （二）乳酸发酵 同型乳酸发酵 乳链球菌（Streptococcus Lactis）、乳酸乳杆菌（ Lactobacillus casei）等进行 异型乳酸发酵 肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroids）进行 双歧发酵 两歧双歧杆菌（Bifidobacterium bifidum）等进行 一、厌氧发酵代谢产物发酵机制 （三）丙酮-丁醇发酵 （四）混合酸与丁二醇发酵 以上两种类型的发酵产物较多，除了利用其生产化工原料外，还经常被用来进行病原微生物的检测。 二、好氧发酵代谢产物发酵机制 微生物好氧发酵糖类物质可生成多种有机酸，其中柠檬酸是最常见的一种。 黑曲霉的柠檬酸发酵机制直到Kerbs(1940年)提出三羧酸循环学说才被人们逐渐认识。 黑曲霉的柠檬酸发酵机制见图3-6. 第四节 氨基酸和核酸的发酵机制 一、氨基酸发酵机制 微生物细胞内氨基酸的来源 直接从培养基中吸收 转氨基作用合成 以糖分解代谢中间体为碳骨架合成 一、氨基酸发酵机制 （一）谷氨酸的发酵途径 (谷氨酸棒杆菌) 谷氨酸的生物合成途径就是经过酵解途径（EMP）和单磷酸己糖途径（HMP）生成丙酮酸。一方面丙酮酸氧化脱羧生成乙酰-CoA；另一方面经CO2固定作用生成草酰乙酸；两者合并成柠檬酸进入三羧酸循环，由三羧酸循环的中间产物α-酮戊二酸，在谷氨酸脱氢酶催化下，还原氨基化合成谷氨酸。 一、氨基酸发酵机制 （二）天冬氨酸族氨基酸生物合成途径 (大肠杆菌) 在细菌中，天冬氨酸的合成是葡萄糖经酵解途径生成丙酮酸，丙酮酸经CO2固定和氧化脱羧进入三羧酸循环，生成草酰乙酸，再经氨基化反应生成天冬氨酸。 一、氨基酸发酵机制 （二）天冬氨酸族氨基酸生物合成途径 在酵母和霉菌等真菌中，天冬氨酸族的赖氨酸是以另外的方式合成的，参见教材P91图3-9. 工业生产赖氨酸目前不采用酵母等真菌主要是有两个原因： 膜透性问题 代谢途径没有分支 一、氨基酸发酵机制 （三）分支链氨基酸发酵机制 (大肠杆菌) 一、氨基酸发酵机制 （四）精氨酸族氨基酸的发酵机制 (谷氨酸棒杆菌) 二、核苷酸发酵机制 （一）嘧啶核苷酸的生物合成 (枯草芽孢杆菌) 一方面糖经过EMP、TCA途径生成天冬氨酸；另一方面，NH3、CO2与ATP生成氨甲酰磷酸，二者缩合通过几步反应生成乳清酸，后者再与PRPP结合，最后生成UMP，再由UMP生成UTP、CTP和TTP. 二、核苷酸发酵机制 （二）嘌呤核苷酸的生物合成 与嘧啶核苷酸的生物合成途径相比，嘌呤核苷酸生物合成途径要复杂的多，整个生物合成的过程可以分成三个阶段：第一阶段是由5-磷酸核糖与ATP反应开始到5-氨基咪唑核苷酸(AIR)合成；第二阶段是从5-氨基咪唑核苷酸开始到次黄嘌呤核苷酸(IMP)合成；第三阶段是由次黄嘌呤核苷酸开始到鸟嘌呤核苷酸(GMP)与腺嘌呤核苷酸(AMP)合成。 二、核苷酸发酵机制 脱氧核苷酸是在核苷酸合成后在二磷酸水平还原合成的，参见教材P93. * * 图3-6 黑曲霉的柠檬酸发酵机制 1-丙酮酸脱氢酶； 2-柠檬酸合成酶； 3-乌头酸水合酶； 4-异柠檬酸脱氢酶； 5-α-酮-戊二酸脱氢酶； 6-琥珀酸脱氢酶； 7-富马酸酶； 8-苹果酸脱氢酶； 9-丙酮酸羧化酶； 10-磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶。 关键问题：柠檬酸是如何积累的？ 转氨基作用 谷氨酸+丙酮酸→α-酮戊二酸+丙氨酸 谷氨酸+草酰乙酸→α-酮戊二酸+天冬氨酸 Transamination 指把氨基从一个化合物转移到其他化合物上的反应过程。是布朗斯坦和克里茨曼（A．E．Braunstein与M．G．Kritzmann，1937）提出的。在生物体内通常为以磷酸吡哆醛为辅酶的转氨酶所催化，此反应一般是可逆的。 微生物可经氨化作用补充新的谷氨酸 从糖代谢中间体合成各种氨基酸 图3-7 谷氨酸棒杆菌的谷氨酸生物合成 NH3 谷氨酸发酵的关键： 生物素亚适量 NH3充足 代谢流强化 谷氨酸棒杆菌将氨基导入谷氨酸有三种方式 细胞外 生物素 图3-8 大肠杆菌的天冬氨酸