PtsnRK基因的遗传转化研究.pdfVIP

摘要 SnRK2 是蔗糖非发酵相关蛋白激酶 SnRK 基因的一个亚家族，受渗透胁迫激活，激发 下游抗逆基因的表达，提高植物的抗逆性。本研究基于从毛果杨克隆获得的 PtSnRK-1 和 PtSnRK-2 基因构建植物过量表达载体，并以南林 895 杨为受体材料，采用农杆菌介导法， 开展杨树的遗传转化研究，为选育抗逆杨树新品种提供基础。主要研究结果如下： 1．进行了杨树叶盘组培不定芽分化和生根的潮霉素敏感性试验，以及抑制菌剂头孢霉 素敏感性试验，确定了叶片的最适宜筛选浓度为潮霉素 3mg/L，生根最适宜筛选浓度为 1 mg/L ，农杆菌 EHA105 的抑菌剂头孢霉素为 200mg/L，农杆菌 LBA4404 抑菌剂头孢霉素 为 100mg/L。 2 ．分别采用农杆菌菌株EHA105 和 LBA4404 ，进行南林 895 杨的遗传转化研究，筛 选获得较合适的遗传转化条件为：采用农杆菌菌株 EHA105，预培养时间为 2～3d，EHA105 侵染浓度 OD600 值为 0.5~0.6，侵染时间 15min，共培养时间是 4d ；如采用农杆菌菌株 LBA4404，预培养时间为2~3d，LBA4404 侵染浓度 OD600 值为 0.6~0.8、侵染时间20min， 共培养时间 5d 。 3 ．采用优化的遗传转化条件，