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普通生物学 基于双链 RNA 的基因沉默 北京大学化学与分子工程学院 毕锦程 1400011736 摘要 Andrew Z. Fire 团队证实了双链RNA 可以导致基因沉默，这一成果开启了 一个新的研究方向，并获得了2006 年诺贝尔奖。本文根据其主要工作成果，展 现“RNAi”（RNA 干扰）理论从无到有并日臻成熟成熟的过程及一些重要的实验， 并进行了讨论与展望。 key words：双链RNA，基因沉默，RNAi基因干扰 一、前言 重要的科学发现不可或缺的就是其创新的一面。在现有的看似坚如磐石的 “完备理论”中，如果能够能够打破思维禁锢、发现特例并产生一套新的理论体 系， 无疑是一项伟大的科学成果了。这个理论可以解释的范围越广，就越能展 示科学普适的美；能够应用于实践的地方越多，就越能展示科学实用的价值。 本文介绍的“RNAi” （即RNA 干扰）理论可以说是生物学领域一次打破旧思 维的革命，它不仅具有科学真理的简洁与普适之美，还有应用于人类生活的巨大 实践价值。 二、双链RNA 诱发基因沉默的发现 双链RNA 可能起源于地球上生命之初，但对这种特殊形态的RNA 的科学 认知从 20 世纪 50 年代才开始。随后便发现了和 DNA 很相似的互补碱基对在 RNA 结构中也存在，且正是由于每条RNA 链互补碱基序列的延伸和配对，两条 互补的RNA 链结合形成了类似双链DNA 的棒状结构。 20 世纪60 年代，实验发现双链RNA 也存在于生物体中。巧合的是，最初 发现的含有双链RNA 的大多被病毒感染过。基于这组实验数据，一个假设产生 了——即这些病毒可以在RNA 复制过程中产生双链RNA 。几乎同一时间，分子 生物学领域在实验基础上建立了中心法则，细胞用双链DNA 和单链RNA 分别 承担长期和短期遗传信息储存的任务。在中心法则中，细胞里的信息流并没有双 链RNA 的位置，二只有在RNA 病毒的RNA 复制中才会出现双链RNA 。由于 中心法则被广泛接受，对双链RNA 作用假设的质疑一直很少。 而随着实验和理论的进一步发展，一些超出经典理论体系的现象不断被发现。 例如，用两种完全不同的病毒感染同一宿主，其中一种病毒 A 的毒性大到足以 杀死宿主动物，而另一种病毒 B 只会轻微致病。一些实验事实表明，先感染良 性病毒B 的宿主，有时却可以在恶性病毒A 的感染下存活。 表明动物体可以 感知病毒感染并诱发相应机制产生作用，抵抗更深的外来危机，但这不是当时已 知意义下的特异性免疫反应，因为这两种病毒之间没有任何联系。这让人们开始 认识这种针对的对象较为广泛的免疫反应，我们不妨称为 “广义免疫反应”。 直到20 年后的两位科学家才分离出一种能引起这种反应的蛋白质——干扰 素。Richard Shope 是一位致力于先天性免疫应用研究的科学家，在二战期间， 他一直在寻找能触发广义免疫反应的一些其他物质，最终他在一种真菌的提取物 上获得了成功。 1 / 9 普通生物学 随着化学提纯技术的进步，Maurice Hilleman 团队从Shope 发现的真菌中纯 化出了真正能引起广义免疫作用的物质，这就是前文提到的双链 RNA 。出人意 料的是，这种RNA 序列与目标病毒的RNA 序列毫无相似之处。实验者又用了 其他毫无联系的人造或天然RNA 做测试，结果都可以诱发“干扰素反应” 。这个 研究引发了许多问题的提出，其中最重要最初始的疑问便是真菌体内为什么会有 并不是来源于病毒的双链 RNA ， 显然与中心法则的理论是不符的。若沿用之 前的理论，这些真菌之前应该被病毒侵染过，这也正是 Hilleman 提出的假设， 而且他们为自己的假设找到了实验依据，他们发现细胞可以通过一个原始的系统 感受病毒侵染时的 “先锋军”，即双链 RNA ，并且立即做出反应，发出令机体 组织全力抵抗病毒的信号。但是显然，双链RNA 的作用机理在这里并未得到合 理的解释。 除了对动物免疫系统的研究外，早在20 世纪30 年代发现动物干扰素反应的