2014届高三生物一轮复习课件： 1.4生物化学与分子生物学技术实践 苏教版选修1（ 2013高考）.pptVIP

1.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，分子大小、电荷的性质和数量情况如图所示，下列有关蛋白质分离的叙述正确的是( ) A．若将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，分子戊在沉淀中，则分子丙也一定在沉淀中 B．若用凝胶色谱法分离样品中的蛋白质，则分子甲移动速度最快 C．将样品装入透析袋中透析12 h，若分子丙保留在袋内，则分子乙也一定保留在袋内 D．若用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子丁形成的电泳带相距最远 【解析】选A。分子丙的相对分子质量大于分子戊的，所以，在离心时分子戊存在于沉淀中，分子丙也一定在沉淀中；用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子甲相对分子质量最小，容易进入凝胶内部，则移动速度最慢；分子丙的相对分子质量大于分子乙，则分子丙保留在袋内，分子乙可能在袋外；SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速度完全取决于分子的大小，因此，分子甲与分子丙形成的电泳带相距最远。 2.关于蛋白质提取的叙述中，不正确的是( ) A．分离与纯化蛋白质之前首先要用适当的方法使蛋白质释放出来 B．抽提时要依据蛋白质的不同特性选择不同的溶剂 C．对蛋白质的粗提取物离心可除去一些小分子杂质 D．蛋白质的粗制品可能是多种蛋白质的混合物 【解析】选C。分离细胞中的蛋白质时需要将细胞破裂使蛋白质释放出来；抽提时要依据蛋白质的不同特性选择不同的溶剂，如酸性蛋白质选用稀碱性溶液提取；对抽提得到的粗提取物离心可除去固体杂质。 3.下列关于离心沉降的说法中，不正确的是( ) A．目标不同，需要控制不同的离心速率 B．能将分子大小、密度不同的蛋白质分离 C．离心时，离心管内的溶液量要相同，但不需要对称放置在离心机内 D．离心后，分子大小、形状不同的蛋白质会分布在不同的沉降层中 【解析】选C。离心沉降法是通过控制离心速率，使分子大小、密度不同的蛋白质发生沉降分层，从而达到分离出不同种类蛋白质的目的，离心时，离心管一定要对称放置。 4.(2012·泰州模拟)下列关于PCR技术的叙述，错误的是( ) A．PCR技术和DNA体内复制所用到的酶种类有所不同 B．PCR反应过程要消耗四种脱氧核苷酸 C．PCR反应用到的引物是一小段DNA或RNA D．原料是从子链的5′端连接上来的 【解析】选D。PCR技术是在体外模拟体内DNA的复制过程，二者需要的条件基本相同，如DNA模板、DNA聚合酶、引物、需要四种脱氧核苷酸等，所不同的是体内解链是靠解旋酶，体外解链是靠高温变性，体内的引物是RNA片段，体外的引物是DNA或RNA片段；不论是体内复制还是PCR技术，原料都是从子链的3′端连接上来的。 5．下列关于血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的说法中，不正确的是 ( ) A．加滤纸桥时，待滤纸条湿润后，要驱除气泡，以便使滤纸紧贴于支架上 B．浸泡薄膜时要识别出光泽面，并做记号 C．平悬薄膜时，有记号的一面朝上 D．从染色液中取出薄膜后，用滤纸条压平并吸干，再浸入透明液中脱色 【解析】选D。薄膜染色后要先放入漂洗液中漂洗数次，直至蛋白质区底色脱净，然后再用透明液脱色。 6.下列有关蛋白质提取和分离的说法，正确的是(多选)( ) A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性 B．采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来 C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离 D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动 【解析】选A、B、C。电泳法分离物质的原理是在电场中，带电物质能向与自身所带电荷相反的方向移动，移动的速度和距离取决于物质所带电荷的量及相对分子质量。 7.下面是某研究小组开展的“猪血浆某白蛋白的提取及相对分子质量测定”研究，请协助完成有关问题： 材料仪器：新鲜猪血、低速冷冻离心机、透析袋、电泳仪等。 化学试剂：pH为7.4的缓冲液、柠檬酸钠、奈氏试剂(与NH4+反应出现黄色或红棕色沉淀)、饱和(NH4)2SO4溶液、生理盐水等。 实验步骤： (1)样品获取：向新鲜猪血中加入__________________，静置一段时间后取上层血浆。 (2)盐析法粗提蛋白质： ①向血浆中加入一定体积饱和(NH4)2SO4溶液，使(NH4)2SO4的浓度达到50％，充分混合后静置、离心，取沉淀物。 ②向沉淀物中加入适量生理盐水使之溶解，再向其中加入一定体积的饱和(NH4)2SO4溶液，使(NH4)2SO4的浓度达到33％，充分混合后静置、离心，取沉淀物。 ③重复步骤①、②2～3次，最后用生理盐水将沉淀物溶解即得粗提品。 盐析粗提“血浆某白蛋白”的主要原理是_________________ ______________________，重复步骤①、②的主要目的是_____ ______