内异症患者性激素受体与基质金属蛋白酶抑制剂-1表达研究.docVIP

内异症患者性激素受体与基质金属蛋白酶抑制剂-1表达研究 　　【摘要】 目的 检测ER、PR和TIMP-1在子宫内膜异位症(EMs)患者的异位内膜和在位内膜中表达，探讨三者在内异症发生发展中的作用。方法 采用免疫组织化学PV-9000法分别检测ER、PR和TIMP-1的表达。研究组：84例EMs的异位内膜和44例在位内膜；对照组：32例子宫肌瘤者正常子宫内膜。结果 异位内膜组织中ER、PR及TIMP-1的表达明显低于正常内膜组织，差异均有统计学意义(P 　　【关键词】子宫内膜异位症；性激素受体；基质金属蛋白酶抑制剂；免疫组织化学 　　 　　子宫内膜异位症（内异症endometriosis,EMs）发病机理有多种学说，随着分子生物学研究的进展，发现性激素和性激素受体在内异症的发生发展中可能起着重要作用，内异症是激素依赖性疾病，近年来研究细胞外基质的降解与重建是异位内膜侵袭并种植于腹膜的关键。基质金属蛋白酶(MMPs)是一组锌依赖的，在结构上高度同源的蛋白水解酶，是降解细胞外基质成分最重要的酶类[1]。有研究表明，基质金属蛋白酶及其组织抑制因子介入了子宫内膜异位症的发生过程[2]，为深入探讨性激素受体和免疫因子在内异症发病中的作用，现采用免疫组化PV-9000法对子宫肌瘤患者的正常子宫内膜和内异症患者的在位内膜和异位内膜作比较，检测雌激素受体(entrogen receptor,ER)和孕激素受体(progesterone receptor,PR)及基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1)在异位内膜中的表达，从而进一步阐明内异症发生发展的机制。 　　 　　1 研究资料与方法 　　 　　1.1标本来源与分组所有标本均取自2003年1月～2006年8月间，青岛大学医学院附属医院妇产科经腹腔镜或开腹手术，均经病理诊断。研究组1为EMs异位内膜组：标本均为异位内膜，大多为卵巢巧克力囊肿，共84例，年龄25.3～50.0岁，平均年龄（38.6±6.6）岁；按美国生育协会修正分期标准(r-AFS)为：Ⅰ～Ⅱ期26例，Ⅲ期28例，Ⅳ期30例。研究组２为EMs在位内膜组：为研究组1中部分内异症患者子宫全切术后对应的子宫内膜，共44例，年龄37.0～50.0岁，平均年龄（43.7±3.0）岁。对照组：因子宫肌瘤行子宫全切术者的正常子宫内膜，共32例，年龄20.0～49.5岁，平均年龄（42.7±7.7）岁。上述患者术前半年内均未接受性激素及抗EMs药物治疗，无其他内分泌类疾病史。 　　1.2标本的制备与检测 　　1.2.1 取材与包埋 术中取卵巢巧克力囊肿壁（异位内膜），子宫肌瘤和部分巧克力囊肿患者的在位子宫内膜，将内膜组织置于10%甲醛液固定，二甲苯透明后石蜡包埋。 　　1.2.2 ER、PR和TIMP-1检测 4 μm连续切片后脱蜡，水化组织切片，3% H2O2去离子水孵育10 min，以阻断内源性过氧化物酶，根据所应用的ER、PR和TIMP-1的要求，严格按北京中山生物技术有限公司提供的具体操作步骤要求进行。 　　1.2.3 结果评定 显微镜下观察，细胞核显色棕褐色者为强阳性，浅棕或浅褐色者为阳性，蓝色为阴性。采用高清晰彩色电子图像分析仪，用平均密度＝棕褐色细胞核/（棕褐色细胞核+蓝染细胞核）代表ER、PR和TIMP-1的表达强度，每个切片选择4个视野，10×40倍镜放大，每个视野测定3次后取均值，由同一人用同一台仪器测定。 　　1.2.4 统计学方法 评分数据用x±s表示，运用SPSS 11.5统计软件处理进行t检验。 　　 　　2 结果 　　 　　结果显示：异位内膜组织中ER、PR及TIMP-1的表达明显低于正常内膜组织，差异均有统计学意义(P 　　综上所述，异位内膜组织中ER、PR、TIMP-1的低表达，表明异位内膜仍保留对激素反应的特性，是其得以种植生长的必要条件，细胞外基质的降解与重建作用增强是关键。异位内膜对激素敏感性的降低，也可能是某些用激素治疗不可能完全根除内异症的原因所在，而内异症患者在位内膜中ER、PR的高表达及TIMP-1表达较低，则是内异症发生发展中的关键因素。 　　 　　参考文献 　　1Amy R,Barlara,Mace L,et al.Matrisian:matris metallopro- teinasesc biologic activity and clinical implications[J].J ClinOncol,2000,18(5):1135 　　2Collette T,Bellehumeur C,Kats R,et al.Evidence for an