荧光偏振就大.PPT

0.91 6.3 0.07 460 1.3 320 Yeas t-RNAPhe Y-base 0.08 6.4 0.04 282 0.2 257 H2O,pH7 Phe 1.4 3.6 0.1 303 1.4 274 H2O,pH7 Tyr 11 2.6 0.2 348 5.6 280 H2O,pH7 Trp 敏感度?max?F 10-2 ?F ns ?F ?em nm ?max 10-3 ?ex nm 条件 生色团 亚硝基奈酚+Tyr 茚三酮（Cu2+,pH5.8)+Phe ?ex:460nm, ?em:570nm ?ex:365nm, ?em:515nm 四 荧光生色团的结构特点 五 影响荧光测量的因素 1 光化分解（photodissociation） 光照后导致化学键断裂——荧光减弱 2 淬灭(quenching) 温度淬灭： 温度每升高10C ，荧光减少的百分比，称为温度系数。 在20-300C的范围内，温度系数大约为1.5。 浓度淬灭： 21 内滤光效应（inner filter effect) (3)杂质淬灭：3O2 1O2 3 溶液pH的影响 利用一些物