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山茱萸多糖研究进展 　　摘 要：山茱萸多糖是山茱萸中的一种主要活性成分之一，具有多种药理作用和生物活性功能，是目前的一个研究热点。笔者对山茱萸多糖的提取、分离纯化、化学结构及生物活性等多方面进行了综述，为山茱萸资源的深入开发起一定借鉴作用。 　　关键词：山茱萸；多糖；分离纯化；化学结构；生物活性 　　中图分类号：R282文献标识码：A文章编号：1673-2197（2008）09-0135-03 　　 　　山茱萸为山茱萸科植物山茱萸(Fructus Corni)的干燥果肉，又名山萸肉、药枣、肉枣等。临床上以除去种子的成熟果实入药，其味酸、涩、微温，归肝肾经，有补益肝肾、涩精固脱之功效，是我国的传统中药材［1-2］。山茱萸果肉中含糖类、有机酸类及其酯类、鞣质类等［3］，是治疗糖尿病、冠心病和高血压病的主要药材。近年来山茱萸多糖的研究已取得一定进展，药理学研究证明，山茱萸多糖是山茱萸生物学活性物质的重要成分。本文就山茱萸多糖的化学和药理学研究情况综述如下。 　　 　　1 山茱萸多糖的提取 　　 　　1.1 热水提取法 　　山茱萸多糖的提取方法通常采用水提醇沉法。一般先将其干燥的果实用95%的乙醇或石油醚脱脂，再经热水提取后，加入一定量的无水乙醇沉淀得粗多糖。粗多糖加水复溶后，再经过透析除去小分子化合物，柱层析纯化醇沉后，即可得山茱萸多糖。张彩莹等［4］利用均匀设计法确定了水提醇沉法的最佳工艺条件：料液比:1∶36，提取温度：100℃，提取时间：180min，多糖的得率为199.36mg/g（相对于预处理的山茱萸粉末）。此法的优点在于提取所用溶剂蒸馏水经济易得，提取率较高，而且操作安全简便，不会造成大的污染。但是此法提取的时间较长且能耗较大。 　　1.2 稀碱提取法 　　李平等［5］以四川产山茱萸为原材料，对山茱萸水提取后的残渣用4倍体积2.5mol/L NaOH，4℃提取4h，重复提取两次。滤过，合并滤液，用HCl中和滤液至中性，减压浓缩，浓缩液经过醇沉、洗涤、真空干燥，得褐色山茱萸碱提粗多糖。此法可使多糖含量增加，但酸碱提易破坏多糖的立体结构及活性，且提取后液体需要中和，程序繁琐，所以较少使用［6］。 　　1.3 超声水提法 　　研究表明［7］，利用超声波的高频震荡、加速度和强烈的“空化效应”及搅拌作用，可加速有效生物活性成分进入溶剂，从而提高提取率、缩短提取时间、节约溶剂，并可在低温下进行，有利于有效成分的保护，同时设备也较为简单，具有广泛的应用前景。张丽娟等［8］利用超声水提法从山茱萸中提取山茱萸多糖，表明影响提取率的主要因素为料液比，最佳提取工艺为料液比1∶20、提取温度80℃、提取时间60min。多糖的平均提取率为：13.65%。 　　 　　2 山茱萸多糖的分析 　　 　　2.1 山茱萸多糖的含量测定 　　目前山茱萸多糖的含量一般采用苯酚-硫酸法［4，9］来测定。 　　2.2 纯度检测［10］ 　　山茱萸多糖的纯度可用聚丙烯酰胺凝胶电泳、醋酸纤维薄膜电泳和凝胶色谱法检测。聚丙烯酰胺凝胶电泳所用缓冲液为pH9.5的硼砂液，染色剂是高碘酸-希夫试剂；醋酸纤维薄膜电泳所用缓冲液为pH12.0的硼砂液，甲苯胺蓝染色；凝胶色谱法所用凝胶为Sephadex G-150和DEAE Sephadex A50，0.1mol/L NaCl洗脱，蒽酮-硫酸法检测。多糖经两种电泳均为单一色带，经凝胶色谱柱层析，流出液均为单峰，再用考马斯亮蓝G-250染色法检测蛋白质含量，即可说明它们均为单一组分。 　　2.3 山茱萸多糖的??学组成分析 　　杨云等人［11］采用气相色谱法，从粗多糖中分离纯化得到了1个级分Co-4，研究表明它是葡萄糖、木糖、半乳糖和岩藻糖等四种单糖组成，其摩尔比为7.75∶3.88∶3.20∶1。 　　舒晓燕等人［12］采用薄层色谱和红外光谱分析法，得出酸性多糖M可能是由两种单糖所组成：葡萄糖，甘露糖或半乳糖。 　　李平等人分别研究了水提［13］和碱提山茱萸多糖的单糖组成，研究表明水提山茱萸多糖PFCAⅢ主要由鼠李糖、阿拉伯糖和葡萄糖以13.74∶50.54∶35.72的摩尔比组成，平均分子量为1.74×10?4，水溶性较差；碱提山茱萸多糖PFCCⅠ由木糖和葡萄糖以18.8∶81.2的摩尔比聚合而成，其水溶性较好。 　　综上所述，山茱萸多糖的单糖主要由戊糖和己糖构成，如戊糖中的木糖，己糖中的葡萄糖、半乳糖、鼠李糖等，此外还有一些单糖衍生物如甘露糖等。这为确定其结构奠定了良好的基础。 　　2.4 山茱萸多糖的理化性质分析 　　糖在浓硫酸的作用下脱水形成糠醛及其衍生物，后者与α-萘酚作用形成紫红色复合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环；与蒽酮作用生成蓝绿色复合物；与苯酚作用生成