普洱茶对胃癌前病变大鼠p53基因表达影响.docVIP

普洱茶对胃癌前病变大鼠p53基因表达影响 　　摘 要 目的：荧光定量PCR检测普洱茶对胃癌前病变大鼠p53基因的表达。方法：建立大鼠胃癌前病变模型，给予普洱茶灌胃1个月后，采用荧光定量PCR检测p53基因的表达情况。结果：普洱茶处理组1个月后，p53 mRNA的表达显著高于未用普洱茶处理组（t3.256，P0.006）。结论：普洱茶可以稳定抑癌基因p53的表达。由此推测普洱茶通过抑制p53的突变或稳定p53基因来抑制大鼠胃癌前病变向胃癌的转化。 　　关键词 胃癌 癌前病变 普洱茶 p53基因 　　 　　AbstractObjective:to measure the p53 gene expression in gastric precancerous lesions of rats after Puer tea treatment by real-time PCR.Methods:We established the gastric precancerous lesions model in rats and treated rats with Puer tea for 1 month.In the end,we used real-time PCR to measure the p53 gene expression.Results:treatment with Puer tea for 1 month,the p53 gene expression in these rats was significanly higher than this in the rats without Puer tea treatment.Conclusion:Puer tea can stabilized p53 tumor suppressor gene expression,which indicated that Puer tea suppressing p53 gene mutation or stability of p53 to inhibit the transformation of rat gastric precancerous lesions to gastric cancer. 　　Key WordGastric carcinoma;Precancerosis;Puer tea;P53 gene 　　胃癌是世界上多数国家常见的消化道肿瘤，死亡率高，严重威胁着人们的生命和健康。胃癌的高发年龄为50～59岁，其次为40～49岁，男性多于女性。按Lauren分型，胃癌可分为肠型和弥漫型两大类，前者多见于高发区，以老年人为主，恶性程度较低，术后预后较好；后者在高、低发区基本一致，患病年龄前移，恶性程度较高，预后不良。因此，胃癌的预防成为目前广大科研工作者研究的热点。 　　饮茶是我国人们的传统习惯。早在神农时，就有饮茶解七十二毒之说。目前研究发现饮茶可以使胃癌发生的危险度降低29%。《梵天卢丛录》（柴萼，著于公元1925年）云：“普洱茶，性温味香，治百病，蒸制以竹?成团裹，价等兼金。”普洱茶作为传统饮料，除能止渴生津和提神外，还有特殊的药用功效。现代医学研究发现普洱茶中的茶多酚类物、茶色素、咖啡碱及多酚糖都是生物化学抗癌成分，能起到防癌、抗癌的作用。基于此，本文通过建立大鼠胃癌前病变模型，探讨普洱茶饮对胃癌前病变大鼠抑癌基因p53的表达。 　　 　　资料与方法 　　实验动物：选用健康雄性SD大鼠36只，体重210±20g（由四川大学华西医学中心实验动物中心提供）。大鼠常规分笼饲养，进食标准饲料，自由饮水。室温保持20～22℃，相对湿度45%～50%，光照时间为每天12小时。大鼠按体重分层，参照随机数字表分为3组，进行为期1个月的实验研究：对照组（C组，n10）自由饮水进食不受任何干预；模型组（M组，n10）参照陈大权［1］等人的方法建立大鼠胃癌前病变慢性萎缩性胃炎的模型，不加任何干预；实验组（E组，n10）参照陈大权［1］等人的方法建立大鼠胃癌前病变慢性萎缩性胃炎的模型，按每只大鼠每日相当于成人体重给药量20倍计算进行灌胃。 　　取材：大鼠断头处死后，取胃，沿胃大弯剖开，暴露正高前胃和腺胃，PBS冲洗干净，均沿腺胃的小弯侧取材，取材大小为0.5cm3/sup，范围从贲门到幽门部。所取材迅速置液氮中备用。 　　检测方法：染料法荧光定量PCR反应（real-time PCR），采用RNA抽提试剂Trizol（Invitrogen），提取组织总RNA并经紫外检测含量。所有操作步骤均按试剂盒说明书进行。反转录按照TaKaRa PrimeScriptTM RT reagent Kit perfect Real