交泰丸活性组分配伍对nit-1胰岛β细胞内脂肪沉积的影响-effect of compatibility of active components in jiaotai pill on lipid deposition in nit - 1 islet β cells.docxVIP

英文缩略词表英文缩写英文全称中文名称AMPKAdenosine Monophosphate Activated ProteinKinase腺苷酸活化蛋白激酶ACCAcetyl-CoA Carboxylase乙酰辅酶A羧化酶BSABull Serum Albumin牛血清白蛋白BBRBerberine小檗碱CACinnamic Acid肉桂酸CPT-1Carnitine Palmitoyl Transferase I肉碱棕榈酰转移酶-ⅠDMSODimethyl Sulfoxide二甲基亚砜FBSFetal Bovine Serum胎牛血清FASFatty Acid Synthase脂肪酸合成酶MetMetformin二甲双胍P-ACCPhosphorylation of Acetyl-CoACarboxylase磷酸化乙酰辅酶A羧化酶PBSPhosphate Buffered Saline磷酸盐缓冲液PAPalmitic Acid软脂酸Sterol Regulating Element Binding ProteinSREBP-1c1c固醇调节元件结合蛋白1cTBSTTris Buffered Saline With 5‰TweenTBST缓冲液TGTriglycerides甘油三酯交泰丸活性组分配伍对NIT-1胰岛β细胞内脂肪沉积的影响中文摘要目的比较交泰丸活性组分小檗碱（BBR）、肉桂酸（CA）以及小檗碱和肉桂酸（BBR/CA） 对 NIT-1 胰岛 β 细胞内脂肪沉积的影响，探索其相关分子机制。方法分别用 25mmol/L 葡萄糖和 0.25mmol/L 软脂酸（PA）干预 NIT-1 细胞 24 小时， 建立高糖和高脂诱导的细胞内脂肪沉积模型，分为模型组、BBR （10μmol/L ）组、 CA（100μmol/L）组、BBR/CA（10μmol/L BBR 和 100μmol/L CA）组、Met（35μmol/L） 组，给予相应药物干预，另设对照组。油红 O 染色法观察细胞内脂肪沉积情况，酶法 检测细胞内甘油三酯（TG）含量，Western Blot 法检测细胞腺苷酸活化蛋白激酶 (AMPK)、脂肪酸合成酶（FAS）、乙酰辅酶 A 羧化酶（ACC）、磷酸化乙酰辅酶 A 羧 化酶（P-ACC）、肉碱酰转移酶-1（CPT-1）的表达，实时荧光定量 PCR（RT-PCR） 法检测固醇调节元件结合蛋白（SREBP-1c）mRNA 的表达。结果与对照组比较，高糖和高脂模型组细胞内脂肪沉积均明显增加，TG 含量增加（均 P0.01）；与高糖和高脂模型组比较，BBR 组和 BBR/CA 组细胞内脂肪沉积减少，TG 含量均显著降低（均 P0.01），与高脂模型组比较，CA 组细胞内 TG 含量无明显变化； 与 BBR/CA 组比较，BBR 组细胞内 TG 含量无显著性差异， CA 组细胞内 TG 含量显 著升高（P0.05）。与对照组比较，高糖和高脂模型组细胞 AMPK、P-ACC 表达均显著降低（均 P0.01），FAS、ACC、CPT-1 表达均显著增加（P0.05，P0.01）；与模 型组比较，BBR、CA、BBR/CA 组细胞 AMPK、P-ACC、CPT-1 表达均显著增加（P0.01， P0.05），FAS、ACC 表达显著降低（P0.05，P0.01）；与 BBR/CA 组比较，BBR 组 细胞 AMPK、FAS、ACC、CPT-1 表达无显著差异，P-ACC 表达显著增加（P0.05）， CA 组细胞 AMPK、FAS、P-ACC 均显著降低（P0.01, P0.05），ACC、CPT-1 无显 著差异。与对照组比较，高糖和高脂模型组细胞 SREBP-1cmRNA 表达均显著增加（P0.01）；与模型组比较，BBR、CA、BBR/CA 组细胞 SREBP-1cmRNA 表达均显 著降低（P0.05，P0.01）；与 BBR/CA 组比较，BBR 组、CA 组细胞 SREBP-1cmRNA 表达降低（P0.01）。结论交泰丸活性组分配伍可减少高糖和高脂诱导的 NIT-1 胰岛 β 细胞内脂肪沉积，其 机制可能与增加 AMPK 表达、减少脂肪合成、增加脂肪氧化有关。关键词交泰丸；小檗碱；肉桂酸； NIT-1 细胞； 脂肪Abstract【Objective】To compare the effect of berberine (BBR), cinnamic acid (CA), berberine and cinnamic acid (BBR/CA), which are contained in Jiaotaiwan, on lipid accumulation in NIT-1 pancreatic β ce