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酶作用基本原理 酶促反应动力学：研究酶促反应速度以及影响反应速度 的因素。决定酶反应速度的因素包括两个方面：酶分子的结构 和反应条件。 前稳态酶促反应动力学（快速反应动力学） 单底物稳态酶促反应动力学 双底物稳态酶促反应动力学 酶抑制剂及其作用 酶的作用机理 酶的调节机理 稳态和前稳态：在0-t1时间内，[S]下降，[P]上升，[ES]上升 并逐渐达到恒定值； [ES]上升的状态称为前稳态（Pre-Steady State)； [ES]达到恒定值， 时的状态称为稳态 （Steady State ）。 前稳态动力学研究，底物反应开始后极短时间内的反应速度，反应过程中酶分子本身的变化，各反应步骤的速度常数，以及各中间复合物等，为酶促反应机制提供直接的信息； 稳态反应动力学研究，底物反应开始之后，达到稳态时的反应初速度，以及各种因素反应初速度的影响，提出从底物到产物之间可能的历程。通常情况下，[S] ﹥﹥[E]。为酶促反应机制提供间接的信息 酶促反应类型 单底物 异构酶 A B； 单向单底物 裂合酶A B+C； 假单底物 水解酶 A-B+H2O A-OH+BH； 双底物 氧化还原酶AH2+B A+BH2 A2++B3+ A3++B2+ 基团转移酶 A+BX AX+B 三底物 连接酶 A+B+ATP AB+ADP+Pi A+B+ATP AB+AMP+Pi 单底物酶促反应动力学 底物浓度对酶促反应初速度的影响 底物浓度对反应初速度的双曲线 中间复合物学说对双曲线的解释 米氏方程式 Km的意义，应用和求法 酶浓度对酶促反应初速度的影响 温度对酶促反应初速度的影响 pH对酶促反应初速度的影响 激活剂和抑制剂对酶促反应初速度的影响。 双底物酶促反应动力学 多底物酶促反应的动力学机制分为两大类：序列 机制（有序和随机）和乒乓机制。 有序序列机制（compulsory order mechanism):底物A和B与酶的结合有严格的顺序，必然是先A后B；产物的释放也有严格的顺序，必须是先P后Q。 随机序列机制（random order mechanism):底物A 和B与酶的结合是随机的；产物P和Q的释放也是随机的。 乒乓机制（ping-pong mechanism):底物与酶的结合和产物的释放是同时进行的。 酶的抑制剂以及应用 研究酶抑制剂极其抑制作用的意义 在理论上，有助于阐明酶活性中心结构，催化机 理，代谢途径以及代谢调节，有助于阐明药物和毒物 作用机理；在实践上，可以为治疗人类和畜禽传染病 而设计疗效更高的抗菌抗病毒药物；为消灭农作物病 虫害而设计更有效的杀虫剂和杀菌剂；为解除毒物对 人畜的中毒而设计快速有效解毒药物。 抑制程度的表示方式 抑制程度是指酶受到抑制后， 其活性降低的程度，是研究酶抑制作用的一个重要指 标，一般用反应速度的变化表示。以V0表示无抑制剂 时的反应速度，V1表示有抑制剂时的反应速度，酶的 抑制程度有以下表示方式： （1）相对活力分数 a = V1/ V0 （2）相对活力百分数 a% = V1/ V0 ×100(%) （3）抑制分数 i= 1- a = 1- V1/ V0 （4）抑制百分数 i% = (1-a) ×100(%) 通常抑制率就是指的抑制分数或抑制百分数。 抑制作用的分类 不可逆抑制作用（irreversible inhibition)： 不可逆抑制剂 与酶分子的必需基团共价结合，引起酶活性丧失，用透析等 物理方法不能去除。 可逆抑制作用（reversible inhibition)：可逆抑制剂与酶分子 必需基团非共价结合，引起酶活性降低或丧失，但用透析等 物理方法可以去除抑制剂而恢复活性。 按酶抑制剂与酶结合方式不