DNA损伤与修复.ppt.pptVIP

DNA既稳定， 但也脆弱 哪些因素能影响到DNA的完整性？ 细胞内源的因素 环境因素 -例如化学试剂、污染物和UV线 疾病治疗 -例如离子辐射和化疗 细胞内源因素 复制错误 例如四种dNTP之间的不平衡导致错配 DNA本身的不稳定 碱基的自发脱氨基 DNA的脱嘌呤/脱嘧啶导致碱基脱落 活性氧的作用 DNA, 蛋白质和脂质的氧化 脱嘌呤/脱嘧啶 脱嘌呤比脱嘧啶更容易 在DNA分子上产生无碱基位点（AP位点） 大肠杆菌 1 次脱嘌呤/ 基因组/ 复制 嗜热水生菌 300次脱嘌呤/ 基因组/ 复制 哺乳动物细胞 10 000次脱嘌呤/ 基因组/ 复制 活性氧（ROS） 由正常的细胞代谢产生 线粒体利用细胞 ~85% O2，是主要的ROS来源 导致DNA、蛋白质和脂质损伤 常见的形式： 过氧化氢 (H2O2) 超氧化物自由基 (O2?-) 一氧化氮 (?NO) 羟基自由基 (HO?) 过氧亚硝基阴离子 (O=NOO-) 烷过氧化物 (ROOH) 烷氧自由基 (RO?) 环境（外源）因素 化学试剂 (1) 天然化合物 黄曲霉素 (2) 人造化合物 苯并芘- 香烟 顺铂- 化疗药物 物理因素 (1)UV (2)离子辐射 γ-射线 x-射线 DNA损伤类型 碱基修饰 碱基丢失-无碱基位点 复制错误：错误 链断裂 蛋白质-DNA交联 DNA-DNA交联 稳定，但脆弱 不修复将导致突变 干扰转录和复制 导致突变 加速衰老 细胞的修复机制是必需的 修复机制是全方位的、高效的 1 /1000损伤躲过修复 DNA 修复 DNA与其它生物大分子一样，在受到机体内外因素的作用下，其结构会遭受到各种各样的损伤，但是，和其它生物大分子不一样的是，DNA是唯一的一种在发生损伤以后可以被完全修复的分子，而其它生物大分子在受到损伤以后要么被降解，要么被取代。当然，并不是发生在DNA分子上的所有损伤都可以修复。如果DNA受到的损伤不能及时被修复，不仅会使DNA的复制和转录受到影响，还可以导致细胞的癌变和早衰。 细胞之所以在DNA受到损伤以后，选择的处理方法是尽量将其修复而不是将其降解，这一是因为作为遗传物质的DNA分子在细胞内只有一个拷贝，如果将其水解的话，细胞也就失去了存在的根基；二是DNA的互补双螺旋结构使得修复一个受损伤的DNA分子变得很容易。正因为如此，一种生物体，即使是那些基因组甚小的生物，也会在修复上投入大量的基因（≥100个基因），这再次说明了DNA的稳定性压倒一切。. 直接修复 嘧啶二聚体的直接修复——由DNA光裂解酶催化。此酶直接识别和结合嘧啶二聚体。然后，利用作为吸光色素的辅基捕捉到的光能，将嘧啶二聚体打开，最后再与DNA解离。但是胎盘类哺乳动物却没有这种酶。 烷基化碱基的直接修复——由特定的烷基转移酶催化 DNA链断裂的直接修复——由DNA连接酶催化。 切除修复 切除修复先切除损伤的碱基或核苷酸，然后，重新合成正常的核苷酸，最后，再经连接酶重新连接，将原来的切口缝合。整个切除修复过程包括识别、切除、重新合成和重新连接。 切除修复又分为碱基切除修复（BER）和核苷酸切除修复（NER），两者的主要差别在于识别损伤的机制上，前者是直接识别具体的受损伤的碱基，而后者并不识别具体的损伤，而是识别损伤对DNA双螺旋结构造成的扭曲。 NER在所有的生物具有相同的步骤： 识别损伤—由特殊的蛋白质完成，并由此引发一系列的蛋白质与受损伤DNA的有序结合； 切除损伤—特殊的内切酶在损伤部位的两侧切开DNA链，随后两个切口之间带有损伤的DNA片段被去除； 修复合成—DNA聚合酶以另外一条链为模板，合成已被切除的序列； 缝合切口—由DNA连接酶催化。 错配修复 （MMR） MMR系统主要用来修复DNA分子上错配碱基对，此外，还能修复一些因“复制打滑”而诱发的核苷酸插入或缺失损伤。 错配修复系统必须能够保证只会将子链上错误的碱基切除，而不会把母链中本来就正确的碱基切除。大肠杆菌的MMR系统的确就是利用甲基化来区分子链和母链的，因此，大肠杆菌内修复复制中产生的错配碱基的系统又称为甲基化导向的错配修复。至于其它细菌和真核细胞如何区分子链和母链的尚不清楚。 损伤跨越 重组跨越使用同源重组的方法将DNA模板进行交换以避免损伤对复制的抑制，从而使复制能够继续下去，而随后的复制仍然使用细胞内高保真的聚合酶，因此忠实性并无下降，故此途径被视为一种无错的系统。 跨越合成又称为（TLS）跨损伤合成，由专门的DNA聚合酶与停留在损伤位点上的原来催化复制的DNA聚合酶交换，在子链上（模板链上损伤碱基的对面）插入正确或错误的核苷酸，结果导致