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第十单元 现代生物科技专题 第1讲 基因工程 课时跟踪练 1．(2016·全国卷Ⅲ)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了、和三种限制内切酶的识别序列与切割位点图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的、的切点是唯一的)。 图(a) 图(b)根据基因工程的有关知识回答下列问题：(1)经酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被________酶切后的产物连接理由是_____________________________________________________________________________。(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子如图(c)所示。这三种重组子中不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有________不能表达的原因是_________________________________________________。 甲　　　乙　　 　　丙　图(c)(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶常见的有________________和________________其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是___________________________________________。解析：(1)由题图可知和两种限制性内切酶的共同识别序列是二者切BamH Ⅰ酶切后得到的目的基因可以与图(b)所示表达载体被酶切后的产物连接。(2)在基因表达载体中启动子应位于目的基因的首端终止子应位于目的基因的尾端这样基因才能顺利地转录再完成翻译过程即顺利表达。图中甲所示的目的基因插入在启动子的上游丙所示目的基因插入在终止子的下游二者的目的基因均不能被转录因此目的基因不能表达。(3)常见的DNA连接酶有连接酶和T连接酶其中T连接酶既能连接黏性答案：(1)　两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端　(2)甲和丙　甲中目的基因插入在启动子的上游丙中目的基因插入在终止子的下游二者的目的基因均不能被转录(其他合理答案均可)　(3)连接酶　T连接酶　T连接酶(其他合理答案均可)(2015·全国卷Ⅰ)HIV属于逆转录病毒是艾滋病的病原体。回答下列问题：(1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时可先提取HIV中的________以其作为模板在______的作用下合成________获取该目的蛋白的基因构建重组表达载体随后导入受体细胞。(2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白该蛋白作为抗原注入肌体后刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是________该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV检测的原理是__________________________________________________________。(3)已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分________细胞降低了患者免疫系统的防卫功能。(4)人体的免疫系统有________癌细胞的功能。艾滋病患者由于免疫功能缺陷易发生恶性肿瘤。解析：(1)HIV的遗传物质是RNA所以要想获得相应的目的基因应以HIV的RNA为cDNA(或DNA)。(2)目的蛋白注入机体后相当于抗原。在抗原的刺激下机体进行体液免疫由浆细胞产生相应抗体(分泌蛋白)由于该抗体能与目的蛋白(抗原)发生特异性结合所以可通过抗体检测出有无目的蛋白从而确定体内有无HIV。(3)HIV主要攻击人体的T(或T淋巴)细胞从而降低机体免疫系统的防卫功能。(4)癌细胞在机体中属于抗原人体的免疫系统能够监控和清除癌细胞。答案：(1)RNA　逆转录酶　cDNA(或DNA)　(2)抗体　抗原抗体特3)T(或T淋巴)　(4)监控和清除(2015·海南卷)在体内人胰岛素基因表达可合成出一条称为前胰岛素原的肽链此肽链在内质网中经酶甲切割掉氨基端一段短肽后成为胰岛素原进入高尔基体的胰岛素原经酶乙切割去除中间片段C后产生A、B两条肽链再经酶丙作用生成由51个氨基酸残基组成的胰岛素。目前利用基因工程技术可大量生产胰岛素。回答下列问题：(1)人体内合成前胰岛素原的细胞是________合成胰高血糖素的细胞是。(2)可根据胰岛素原的氨基酸序列设计并合成编码胰岛素原的________序列用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体再经过细菌转化、筛选及鉴定即可建立能稳定合成________的基因工程菌。(3)用胰岛素原抗体检测该工程菌的培养物时培养液无抗原抗体反应菌体有抗原抗体反应则用该工程菌进行工业发酵时应从________中分离、纯化胰岛素原胰岛素原经酶处理便可转变为胰岛素。解析：(1)由题意可知前胰岛素原在细胞内经加工后成为胰岛素人体合成胰岛素的细胞是胰岛B细胞所以合成前胰岛素原的