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中药提取物中总黄酮分析研究 　　摘要: 用NaNO?2-Al(NO?3)?3-NaOH分光光度法测定了8种中药提取物中的总黄酮，考察了方法的回收率和精密度.实验表明：以芦丁为标准对照品、510nm为测量波长，所得线性回归方程A=10.9942C+0.0015，相关系数R=0.9999.此方法稳定性好、操作简单快速、结果准确可靠，可作为中药提取物中总黄酮测定的分析方法. 　　关键词: 中药提取物；总黄酮；可见分光光度法 　　中图分类号:R284.2 　　 文献标识码:A文章编号:1672-8513(2010)06-0414-03 　　 　　The Determination of Total Flavonoids from Chinese Herbal Extracts 　　ZHANG Jing, YU Jia?jin, DAI Jian?hui, ZHU Rong?gang, XU Yan?mei, WANG Hong?bin 　　 (School of Chemistry and Biotechnology, Yunnan University of Nationalities, Kunming 650031, China) 　　Abstract: The total flavonoids from eight Chinese herbal extracts were determined by NaNO?2-Al(NO?3)?3-NaOH spectrophotometry and the recovery rate and precision were studied. The experiment showed that with rutin as the standard sample and NaNO?2-Al(NO?3)?3-NaOH as the color reagent, the content of flavonoids was determined by VIS-spectrophotometry at the wavelength of 510nm. The regression equation was A=10.942C+0.0015, the correlation coefficient R=0.9999. The results show that this method can be used to detect the total flavonids of Chinese herbal extracts because it is simple, convenient, and rapid. 　　Key words: herbal extract; total flavonoids; VIS-spectrophotometry 　　 　　近年来，现代中医学研究表明，天然植物药中的黄酮类化合物具有降血糖和血脂、降低心肌耗氧量、软化血管、抗心律不齐、使冠脉和脑血管流量增加等功能［1-2］.植物中总黄酮测定有高效液相色谱法［3］、三氯化铝比色法、毛细管电泳法［4］、紫外分光光度法等方法.目前，中药提取物的总黄酮含量测定一般采用高效液相色谱法，但此方法不易普及且仪器昂贵，实验过程中处理时间长，色谱条件的选择也存在一定的问题.实验结果表明，NaNO?2-Al(NO?3)?3-NaOH分光光度法［5］能够快速准确地测定中药提取物中的总黄酮,因而得到广泛的使用. 　　 本文选用芦丁为标准对照品，拟通过加标回收率和精密度考查该方法对多种中药提取物市售品中总黄酮的测定，以对中药提取物市售品中总黄酮的质量控制提供依据。 　　1 实??部分 　　1.1 主要试剂与仪器 　　 灯盏花(A：昆明龙津药业有限公司；B：红河千山生物公司)；金银花、丹参、丁香、芦荟、黄芩、杜仲、天麻提取物（购自巨邦植物原料有限公司）；芦丁标准对照品（Sigma公司）；无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠均为分析纯. 　　 7220可见分光光度计（尤尼柯仪器有限公司）；电子分析天平；超声振荡仪（奥特塞恩斯仪器有限公司）. 　　1.2 实验方法 　　1.2.1 芦丁标准曲线的绘制［6］ 　　 1）标准溶液 ［7］ 　　 精确称取120℃下干燥至恒重的芦丁标准对照品5mg，用60%乙醇溶解定容至50mL，配制成质量浓度为0.1mg/mL的芦丁标准品溶液，作为贮备液备用［8］. 　　 2）测量波长的选择 　　 按照芦丁标准曲线绘制进行波长扫描［9］，以确定最大吸收波长. 　　 3）芦丁标准曲线的绘制 　　 精确量取一系列不同体积的芦丁标液显色、定容，以试剂空白为参比测定吸光度，绘制标准曲线，