功能化磁性复合微粒分解及其在生物医学领域的应用研究.pdfVIP

功能化磁性复合微粒合成及其在生物医学领域的应用研究 严向阳 它基质(主要为高分子材料)构成的具有超顺磁性的胶态复合材料。它既有固体 材料的特性，又具有液体材料的流动性。通过表面修饰的功能化连接臂或氨基、 羧基、巯基等功能化活性基团可以固定酶、抗体(单克隆或多克隆)及寡核苷酸 等生物活性物质。由于具有高效、快速、低毒、操作简单等优点，可将其广泛应 用于固定化酶、细胞分选、免疫检测、药物载体及核酸的纯化、分子杂交与检测 等生物和医学领域。硅烷化磁性复合微粒有好的磁响应性、生物相容性、超顺磁 性和丰富的表面功能基团，也被用于细胞学、免疫学、分子生物学等研究领域。 国内在合成磁性复合微粒方面有了一定的工作基础，但在该领域的研究及产 品开发的速度较慢，几乎没有商品化的产品。挪威的Dynal公司最早将该类产品 商品化，现在美国、德国等国家已经有相应的检测试剂盒和自动化仪器上市，但 价格昂贵。磁性复合微粒具有优良的分离和富集特性，以磁性复合微粒为基础， 开发相关试剂盒和仪器是我国在该领域的研发目标，以尽快填补国内空白。本论 文主要完成以下几方面的工作： 1．利用化学共沉淀法合成纳米级F8304粒子，并对其表面进行直接硅烷化(3一 氨丙基三甲氧基硅烷)修饰，得到末端具有二NH2的磁性复合微粒，再通过戊二酸 酐转化为末端具有-COOH的磁性复合微粒，优化反应条件，对其进行红外、X衍 射、激光粒度以及透射电镜表征，借助于线性电位滴定和电导滴定，建立了定量 nm，磁响应性能 表征官能基团的方法。实验结果表明：合成的Fe304粒径约为15 好，具有超顺磁性，功能化磁性复合微粒表面州H2含量为400±50 rtmol／g；一COOH 为含量为380±50 gtrnol／g。可通过共价作用固定生物大分子，并应用于分离和微检 测领域。 2．在-NH2末端磁性复合微粒表面利用戊二醛二步法固定牛血清白蛋白(BSA) 见分光光度计测定偶联效率，并进行酶联免疫吸附检测(ELISA)测定所固定蛋白 (或抗体)的活性，结果表明：在不同偶联剂作用下，固定时间和效率不同，EDC 法和PDC法明显优于戊二醛二步法。BSA固定效率可以达到108～130 mg／g， mg／g；ELISA操作简单快速，显色反应对照明显， HIVIgG固定效率可以达到60～75 结果表明硅烷化磁性复合微粒可用于抗体抗原纯化，细胞分离，临床酶免检测等 领域。 3．采用苯二异硫氰酸酯法(PDC)固定寡聚核苷酸探针并开展核酸杂交检测， 通过荧光检测的结果表明；对核苷酸探针的固定效率可以达到l、2 nmol／mg，杂交 实验结果明显，可以用于基因分离与检测。 4．利用乳液体系合成具有核壳结构的磁性壳聚糖复合微粒，作为磁定位的靶 向药物载体，吸附阿霉素后用于对恶性肝肿瘤进行治疗。实验结果表明：磁性壳 nm，磁响应强，免疫贩性低，药物承载量高，治疗效果 聚糖复合微粒粒径为200 明显，在靶向药物方面有许多优点。已经引起众多科学家的广泛兴趣。 关键词： 磁性复合微粒合成表征固定化生物大分子 II on ofFunctionalized Studies Composite Synthesis Magnetic and inBiomedicine Particles