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黄杆菌肝素酶I基因克隆与表达 　　摘要：目的 克隆并表达黄杆菌肝素酶I（HepI）基因。方法通过PCR从黄杆菌基因组DNA中扩增黄杆菌HepI 基因，验证后插入到表达质粒pET-22b 中构建表达载体，重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行蛋白质表达，并用Azure A法测定酶活性。结果PCR 扩增得到序列正确的HepI基因，并将该基因成功插入到pET-22b 表达载体中。重组质粒转入E.coli BL21(DE3)后表达的蛋白质经SDS分析，与目的蛋白质的相对分子质量基本一致，其活性约为50 U/LA600。结论克隆并成功表达了黄杆菌HepI基因。 　　关键词：肝素酶I；克隆；基因表达；酶活性 　　中图分类号：Q557文献标识码：A文章编号：1672-979X(2008)07-0005-03 　　Cloning and Expression of Flavobacterium heparinum Heparinase I Gene 　　FU Wen-bin, XIONG Ke-qiang, KAN Meng-yuan, ZHAO Jian*, LI Su-xia, JI Sheng-li, YUAN Qin-sheng 　　 (1. State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China Univer