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基础微生物实验板书PPT

实验一 显微镜的构造和使用方法与细菌的革兰氏染色;;2.实验内容 (一)普通光学显微镜的构造? 分光学和机械两大部分。光学部分包括接目镜、接物镜、集光器、光源等;机械部分有镜筒、镜臂、镜座、旋转器、载物台、光圈、倾斜关节、调节螺旋、次台等。 ;;;思考题 1、绘出你所观察到的细菌形态图。 2、观察细菌时为何使用油镜?它与普通物镜在使用方法上有何不同? 3、光学显微镜的目镜与物镜的常用放大倍数?显微镜的放大倍数越高,分辨力越高吗?为什么?举例说明。 1、绘出你所做的革兰氏染色制片中细菌的形态图,并标明总放大倍数及染色反应结果。 2、详叙革兰氏染色的原理及操作方法,染色时应注意哪些问题?;实验二 培养基的制备;;;;;实验三.微生物的分离培养与纯培养 ;;;;;5、作业与思考题 1.采用平板划线分离法和平板接种斜面法,从大肠杆菌和四联球菌(或微球菌)的混合菌液中,分离纯化出大肠杆菌。所用分离培养基为普通营养琼脂。 2.同上述操作,从被杂菌污染的酸奶发酵剂中分离纯化出保加利亚杆菌或嗜热链球菌。所用分离培养基为乳清琼脂培养基。 3.将所分离的目的菌菌落进行革兰氏染色并绘出细胞形态图与描述菌落特征。 4.详述平板划线分离操作过程和斜面接种方法。如果接种后经培养未长出菌落或菌苔,是何原因? 5.一般微生物的接种方法有几种?用途?;实验四 生理生化反应试验;;;5.结果与思考题 1.将实验结果填于表6-1中。 附:(1)糖发酵试验结果记录:“+”——产酸;“”——产酸、产气“”——阴性。其他试验结果:“+”——阳性反应;“-”阴性反应。 2.细菌的生化反应试验意义何在?要对一个未知菌进行分类鉴定,通常要做哪几方面工作? 3.吲哚是怎样产生的?做吲哚试验可用什么样的合成培养基代替蛋白胨水? 4.如果NO2反应也是阴性的,这种细菌有无硝酸盐还原力? 5.M·R反应、V-P反应、吲哚试验的反应物、产物、结果? 6.吲哚(Indol)试验,V-P试验,柠檬酸盐(Citrate)利用试验,甲基红(M·R)试验,又简称什么试验。 7.利用石蕊牛乳试验,可以观察到试验菌的哪些特性?;实验五 霉菌的小室载片培养 ;;;5实验作业 1.采用试管斜面??养与平板培养法培养根霉、毛霉、黑曲霉、青霉。 2.采用小室载片培养法培养黑曲霉、青霉,并详述小室载片培养法的操作过程。所用分离培养基为乳清琼脂培养基。 3.将所分离的目的菌落进行革兰氏染色并绘出细胞形态图与描述菌落特征。 4.详述平板划线分离操作过程和斜面接种方法。如果接种后经培养未能长出菌落或菌苔,是何原因? 5.一般微生物的接种方法有几种?用途?;实验六 食品中常见菌类的观察 ;;3.实验操作要点 (1)细菌的革兰氏染色,观察菌体形态。 (2)水浸片法:载玻片→滴一滴生理盐水→接菌→盖上盖玻片→镜检 (3)细菌及酵母菌菌落形态描述包括:大小、颜色、隆起度、边缘、光泽、透明度、表面形状、形状、质地、味道等 (4)霉菌菌落形态观察描述包括:大小、颜色、组织状态 4.注意事项 (1)仔细观察并详细描述菌落特征; (2)水浸片法加盖玻片时注意防止气泡产生。; 5.结果与思考题 1.描述所观察细菌的菌落特征,并绘图说明其个体形态特征。 2.绘图说明你所观察的酵母菌的个体形态特征?水浸制片时应注意什么? 3.根据观察结果绘图说明根霉,毛霉,曲霉(低倍镜下),青霉(高倍镜G)个体形态特征,并标明结构名称。 4.描述上述四类霉菌的菌落特征。 5.列表说明青霉属与曲霉属,毛霉属与根霉属在形态上的异同。 6.你如何根据显微镜下观察结果及菌落形态区分上述四类霉菌。 7.你观察到的青霉与曲霉,毛霉与根霉的菌丝有无隔膜?它们各属于真菌类的哪一纲?;实验七细菌的平板菌落总数测定;;;5.实验结果与思考题 1为什么溶化后的培养基要冷却至45℃左右才能倒平板? 2为要使平板菌落数计算准确,需要掌握那几个关键?并说明理由。 ;实验八.大肠菌群测定 ;;;;实验九 微生物显微镜直接计数;;3.实验操作要点 (1)直接涂片法:乳酸菌样品→倍比稀释→涂片→染色→镜检→计数 (2)血球计数法: 酵母菌样品→倍比稀释 ↓ 血球计数器→盖上特制的厚盖玻片→加样→静置→显微镜计数 ;4.注意事项 (1)直接涂片操作时,取菌样0.01ml时要精准,而且精确涂布于1平方厘米格内,否则菌体计数误差极大。 (2)血球计数操作时,应静置数分钟,应避免菌体流动,影响菌体计数。 (3)计数时注意计数显微镜视野中不同深度的菌体。 (3)物镜测微尺使用时先以低倍镜寻找测微尺位置,再测定油镜镜头尺寸。 (4)血球计数器、物镜测微尺使用后

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