水处理生物学实验2014年5月发给水排水PPT.pptVIP

四.接种初发酵水样的培养皿，倒置于37℃培养24h，培养到长出明显菌落。 五、结果与分析 画图分析菌落形态 。 六、问题和讨论 培养时，为什么要把已接种的培养基倒置保温培养？ 菌落厚，有金黄色光泽呈圆形状，可断定为金黄色葡萄球菌 菌落边缘光滑，有点湿润、粘稠的圆形可断定为大肠杆菌 菌落边缘褶皱不规则、淡黄色可断定为枯草芽孢杆菌 菌落与菌苔 菌落 菌苔 实验五 细菌革兰氏染色 简单染色法是只用一种染料使细菌着色以显示其形态的方法难于对细菌细胞进行分类。 革兰氏染色法法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G－)和革兰氏阴性菌(G＋)两大类，是细菌学上是常用的鉴别染色法。 该染色法所以能将细菌分为G－菌和G＋菌，是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。G－菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经番红复染后就成红色。G＋菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层脱水而孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色。 一、实验目的和内容 目的：巩固无菌操作技求，掌握细菌及其结构的染色技术。 内容：学习革兰氏染色技术。 二、实验材料和用具 （1）?????? 大肠杆菌（E.coli）菌液 （2）?????? 革兰氏染色液(结晶紫染液、卢戈氏碘液、95％乙醇、沙黄（番红）染色液等)、 （3）????香柏油、二甲苯；显微镜、擦镜纸、接种环、载玻片、吸水纸、试管、小滴管、酒精灯。 三、操作步骤 1、制片 （1 ） 涂菌 滴一滴无菌水在载玻片中央，用接种环以无菌操作方法从培养基上挑取少许菌种与玻片上水滴混匀后，在洁净无脂的载玻片上做一薄而均匀、直径约1cm的菌膜。涂菌后将接种环火焰灭菌。 （2）干燥 于空气中自然干燥。亦可把玻片置于火焰上部略加温加速干燥(温度不宜过高)。 （3）固定 目的是杀死细菌并使细菌粘附在玻片上，便于染料着色，常用加热法，即将细菌涂片面向上，通过火焰3次，以热而不烫为宜，防止菌体烧焦、变形。此制片可用于染色。 实验内容 实验一 显微镜使用及微生物观察（教材实验一） 实验二 培养基的制备 （教材实验六） 实验三 消毒和灭菌 （教材实验六） 实验四 微生物的接种技术（教材实验七实验九） 实验五 细菌革兰氏染色（教材实验四） 实验六 水中大肠杆菌群的测定（教材实验九） 实验一 显微镜使用及微生物观察 一、实验目的 1.掌握显微镜的结构、原理，学习显微镜的操作和保养方法 2.观察细菌的形态并绘图 3.培养通过实验发现问题、分析问题、解决问题的能力 二、仪器和材料 光学显微镜、擦镜纸、香柏油、 二甲苯、细菌标本 三、实验步骤 1.显微镜的取送：①右手握镜臂；②左手托镜座；③置于胸前。 2.显微镜的旋转：①镜筒朝前，镜臂朝后；②置于观察者座位前的桌子上，偏向身体左侧，便于左眼向目镜内观察；③置于桌子内侧，距桌沿5cm左右。 3.对光：①转动粗准焦螺旋，使镜筒徐徐上升，然后转动转换器，使低倍物镜对准通光孔；②用手指转动遮光器（或片状光圈），使最大光圈对准通光孔，左眼向目镜内注视，同时转动反光镜，使其朝向光源，使视野内亮度均匀合适。  4.低倍物镜的使用：①用手转动粗准焦螺旋，使镜筒徐徐下降，同时两眼从侧面注视物镜镜头，当物镜镜头与载物台的玻片相距2～3mm时停止。②用左眼向目镜内注视（注意右眼应该同时睁着），并转动粗准焦螺旋，使镜筒徐徐上升，直到看清物象为止。如果不清楚，可调节细准焦螺旋，至清楚为止。 5.高低倍物镜的使用 6.油镜的使用： A、将标本片放载物台上，用标本推进器固定，将欲检部分移至接物镜下。先用低倍镜找出标本的位置，然后提高镜筒，在标本的待检部位滴香柏油一滴，再换油镜观察。 B、转动粗调节器使载物台徐徐上升（或使镜筒渐渐下降），直至油镜头浸没至油中。此时眼睛应从侧面观察，以免压碎标本片和损坏镜头。 C、然后双眼移至接目镜，一面从接目镜观察，一面反方向缓慢地转动粗调节器（下降载物台，或上升镜筒），当出现模糊物象时，换用细调节器，转动至物象清晰为止。 D、观察完毕，应先提高镜筒，并将油镜头扭向一侧，再取下标本片。油镜头使用后，应立即用擦镜纸擦净镜头上的油。若镜油粘稠干结于镜头上，可用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭镜头，并随即用干的镜纸擦去残存的二甲苯，以免二甲苯渗入，溶解用以粘固透镜的胶质物，造成镜片移位或脱落。  11.显微镜使用时异物的判断：目镜、物镜或装片上，通常通过移动玻片（是否在玻片上），转动转换器（是否在物镜上）来判断，剩下在目镜上。 12. 实验