荧光定量PCR工作原理及应用PPT.ppt

何 谓 PCR?;荧光PCR/实时定量PCR技术应用简介（fluorogenic quantitative PCR, FQ PCR） ; 荧光定量PCR技术 ;扩增;置换;扩增完成; Ct值 ; Ct值与起始模板的关系;2. FQ—PCR的优点 FQ—PCR技术是融合了PCR技术与DNA探针杂交技术的优点，实验的整个过程只在加样时打开1次反应管，在PCR的每个循环中可以直接监测到荧光信号的变化，根据PCR反应酶动力学特点分析软件会自动对DNA进行定量，因此也有人称FQ-PCR为实时荧光定量PCR（Real-time quantitative PCR）。其优点为：①FQ-PCR解决了传统PCR技术不能定量和扩增产物污染的问题。②避免了普通定量PCR操作过程中的污染，FQ-PCR只在加样时打开反应管1次。③FQ-PCR操作简便、快捷、结果准确，不需要普通PCR扩增后进行电泳或放射自显影观察结果，方便了临床上应用。④FQ-PCR可以对每一批扩增样本进行扩增效率的评价。对DNA做系列稀释，每个稀释浓度的DNA对数值与其Ct值做回归分析，PCR的扩增效率的计算方法为：效率=10-1/斜率。通过计算扩增效率可以对仪器、操作人员和试剂进行综合评定。 ;7000定量原理;定量PCR原理;Rn (荧光信号);Ct;7000 化学原理 ITaqMan? 探针法;7000 化学原理 II TaqMan? MGB探针法;NFQ;TaqMan? MGB探针特点;7000 化学原理 IIISYBR? Green荧光染料法;目标DNA序列;扩增及其完成;TaqMan?和SYBR?Green的区别;7000荧光定量PCR仪应用;7000荧光定量PCR仪应用;7000荧光定量PCR仪应用 I核酸实时定量;;;7000荧光定量PCR仪应用 II等位基因鉴定(SNP检测);光学原理图